脑室内注射链脲佐菌素大鼠海马神经元和突触的超微结构异常

第２７卷第１期　２００８年２月　电　子　显微学报　Ｖ０１．２７．Ｎｏ．１　２ｏｏ８．０２　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ　Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ　Ｓｏｃｉｅｔｙ　文章编号：１０００。６２８１（２００８）０１．００６７．０６　脑室内注射链脲佐菌素大鼠海马神经元和突触的　超微结构异常　岳志霞　，崔艳君　，王蓬文　，田金洲　，王　蓉　，盛树力　（１．首都医科大学基础医学院病理学教研室，北京１０００６９；２．北京中医药大学东直门医院，　北京１００７００；３．教育部神经变性病学重点实验室，北京１ｏ０ｏ５３）　摘　要：目的：观察侧脑室内重复注射小剂量链脲佐菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ，ＳＴＺ）阿尔茨海默氏病（ａｌｚｈｅｉｍｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）　模型大鼠的学习记忆和海马神经元的超微结构改变。方法：采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫进行行为学测试；取海马ＣＡ１区组　织制成超薄切片，透射电镜观察。结果：模型组大鼠Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫平均游泳时间及平均游泳距离明显延长。海马　ＣＡ１区神经元出现程度不等的退行性变。细胞核形态不规则，部分核内染色质浓集；胞浆内脂褐素颗粒增多，高尔　基囊泡扩张，严重者出现早期细胞凋亡改变。神经毡内可见有髓鞘轴突胞质内脂褐素颗粒明显增多，突触结构异　常．突触小泡聚集增多，分布无序。突触后膜胞质面上的致密斑不规则增厚，或断断续续不完整。结论：侧脑室内　注射ＳＴＺ可引起大鼠海马神经元和突触的超微结构病变，导致大鼠学习记忆能力减退。　关键词：阿尔茨海默病；链尿佐菌素；海马；神经元；突触；超微结构　中图分类号：Ｒ７４１．０２；Ｒ３６１　．３；Ｑ３３６　文献标识码：Ａ　阿尔茨海默氏病（ａｌｚｈｅｉｍｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）是一种　神经退行性疾病，典型特征是不可逆转的进行性记　忆丢失和认知功能障碍，最后导致完全痴呆。患者　１．２模型建立　动物禁食不禁水１２　ｈ后，１０％水合氯醛（４０　ｍｓ／　）腹腔麻醉，将麻醉大鼠固定在立体定位仪上。　ＳＴＺ按３　ｍｇ／ｋｇ的用量，以２５　ｍｓ／ｍｉ溶于人工脑脊液　可伴随出现失忆、失语、失认、定向计算判断障碍、性　格行为等改变，严重影响生活质量…。关于ＡＤ病　中，两侧脑室内各注射２０　ｌ，第１、３天各注射１次。　对照组大鼠在相同条件下侧脑室内注射同等体积的　人工脑脊液。　１．３行为学检测　注射ＳＴＺ　２１天后，采用Ｍｏｒｉｒｓ水迷宫进行行为　因和发病机制的假说有很多，包括：遗传缺陷、Ｂ．淀　粉样蛋白（Ｂ．ａｍｙｌｏｉｄ，邱）沉积、神经营养因子缺乏、　线粒体功能异常、微量元素的神经毒性作用、能量代　谢障碍以及氧化应激等　Ｊ。建立理想的动物模型对　探明ＡＤ的病因、病程及治疗极为重要。Ｓｈａｒｍａ　学测试。Ｍｏｒｉｒｓ水迷宫由中国医学科学院药物研究　所研制。主要由一个圆柱形不锈钢水池、可移动的　有机玻璃平台及图像自动采集、处理系统等组成。　实验前，预先在水池中注入自来水，水深３０　ｅｍ（水　面高出站台表面１　ｃｍ，使大鼠不能见到站台），站台　位于一个象限的，加入奶粉使水池中水呈乳白　等　采用侧脑室内注射链脲佐菌素（ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｃｉｎ，　ＳＴＺ）的方法，能使大鼠出现明显的学习、记忆能力下　降和脑能量代谢障碍，提出这种方法可作为研究散　发型ＡＤ的动物模型。本文应用透射电镜技术，对　上述模型大鼠海马神经元的超微结构进行观察，为　探讨ＡＤ的发病机制提供形态学依据。　色，水温保持在２１　ｏＣ±１　ｏＣ。试验共进行５天，前２　天训练，后３天测试。每天训练２次，入池位置分别　１材料与方法　１．１实验动物和分组　为站台所对及相邻象限，将大鼠投入水池中，并使大　鼠落水时面向池壁，记录大鼠从入水到爬上平台所　需的时间（即逃避潜伏期）及游泳距离，经１２０　ｓ未　找到站台者，将其引领至站台，放置１０　ｓ，引导其学　习记忆。第３天起重复如上操作，但不再对未找到　站台的大鼠进行引导。　雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠３０只（由首都医科大学实验动　物中心提供），体重３３０　ｇ±１０　ｇ，饲养于首都医科大　学实验动物室ＳＰＦ级鼠房。随机分为正常对照组和　模型组，每组１５只。　收稿日期：２００７．０３．叭；修订日期：２００７．０６．１４　基金项目：国家重点基础研究发展计划９７３项目（Ｎｏ．２００３ＣＢ５１７１０４）．　作者简介：岳志霞（１９８２一），女（汉族），北京人，硕士．　＊通讯作者：王蓬文（１９６３一），女（汉族），山东省蓬莱市人，教授，硕士研究生导师　维普资讯 http://www.cqvip.com

６８　电子显微学报Ｊ．Ｃｈｉｎ．Ｅｌｅｃｔｒ．Ｍｉｃｒｏｓｃ．Ｓｏｃ．　第２７卷　１．４外周血糖水平测定　结果以平均值±标准差（Ｍ±ＳＤ）表示，使用　ＳＰＳＳ　１０．０统计软件处理，用ｔ检验进行统计学分　析，Ｐ＜０．０５为差异具有统计学意义。　实验动物于手术前及术后２１天检测尾静脉血　糖水平，比较两组是否有差异。　１．５电镜标本的制备和观察　将大鼠麻醉后开胸暴露心脏，用０．９％生理盐　水约２００　ｍｌ和４％多聚甲醛２５０　ｍｌ经左心室一升主　２　结果　２．１术前对照组　动脉先后快速灌流固定，断头取脑，冰浴中快速剥　离海马组织，取海马ＣＡ１区脑组织，将其切成１　ｍｍ　的小块，２．５％戊二醛溶液４ｃＩ＝固定２　ｈ，用０．０１　大鼠血糖４．９９　ｍｍｏｌ／Ｌ±０．５７　ｍｍｏｌ／Ｌ，模型组血　糖５．１９　ｍｍｏｌ／Ｌ±０．５５　ｍｍｏｌ／Ｌ；术后２１天对照组血　糖４．７８　ｍｍｏｌ／Ｌ　ｆｌ＝０．８０　ｍｍｏｌ／Ｌ，模型组血糖４．８６　ｍｍｏｌ／Ｌ±０．５３　ｍｍｏｌ／Ｌ。手术前后，对照组和模型组　的平均外周血糖水平没有明显差异（Ｐ＞０．０５）。　２．２水迷宫实验结果　ｍｏｌ／Ｌ　ＰＢＳ洗３次，１０　ｒａｉｎ／次，１％锇酸后固定２　ｈ，梯　度酒精脱水，Ｅｐｏｎ８１２环氧树脂包埋后样品先制成１　ｔｔｍ半薄切片，天青．美兰染色，光镜下定位，选取海　马ＣＡ１区富含神经元部位制成超薄切片，醋酸双氧　铀／枸橼酸铅双重染色，Ｐｈｉｌｉｐｓ　ＥＭ２０８Ｓ型透射电镜　观察、摄片。　１．６统计方法　将大鼠游泳时间平均值和游泳距离平均值作为　学习记忆的指标进行对比，结果显示，模型组大鼠的　平均游泳时间和平均游泳距离明显长于对照组（表　１、表２）。　表１　Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫游泳时间（Ｓ）　Ｔａｂｌｅ　１　Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ　ｔｅｓｔ＂刚　ｍｌＩＩｉｎｇ　ｔＪｌｌｌｅ（ｓ）　Ｍ±ＳＤ；与对照组相比，∞ｃｏｎｔｒｏｌ，”Ｐ＜０．Ｏｌ。　表２　Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫游泳距离（ｉｌｌｆｌｆｌｎ）　Ｔａｂｌｅ　２　Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ　ｔｅｓｔ－ｓｗｉｍｌｎｉｎｇ　ｄｉｓｔａｎｃｅ（ｉｌｌｆｌｆｌｎ）　Ｍ±ＳＤ；与对照组相比，∞ｃｏｎｔｒｏｌ，“Ｐ＜０．Ｏｌ。　２．３大鼠海马ＣＡ１区神经元电镜观察　２．３．１对照组　２．３．２模型组　大鼠海马ＣＡ１区神经元出现程度不等的退行　性变，病变轻者核形状基本正常，核内可见少数分散　大鼠海马ＣＡ１区神经元形态完整，结构清晰，　核形态正常，染色质均匀分布，胞浆内细胞器丰富。　的、大小不等的染色质浓聚团块，核周体胞浆内细胞　器变化不明显（图１）；病变稍重者，细胞核形态不规　则，核膜出现分叶状凹陷，部分核内染色质浓聚、边　高倍镜下神经元核周体胞质内粗面内质网呈板层状　排列，多聚核糖体丰富，有较发达的高尔基复合体，　线粒体呈圆形或椭圆形，双层外膜清晰、嵴完整。神　经毡内突触结构正常。　集，核周体胞质内可见高尔基复合体囊泡扩张，脂褐　素颗粒显著增多（图２）；病变较重者，神经元核内染　维普资讯 http://www.cqvip.com

第1期岳志霞等：脑室内沣射链脲饩菌素大鼠海马冲经元和突触的超做结构异常69图1模型组大鼠海马2CAl区神经元细胞核(N)核内有轻度染色质浓聚核周体胞质内各细胞器变化不明显可见少数脂，，褐素颗粒；图模型组大鼠海马3CAl区神经元细胞核(N)形忿不规则核膜凹陷呈分叶状胞质内高尔基囊泡扩张脂褐、，，素颗粒明显增多；图、模型组大鼠海马CAl区4}II现捌亡早期改变的神经元其细胞核(N)染色质浓聚成较大的不规则团，块边集胞质内高尔基囊泡(G)轻度扩张；图，模型组大鼠海马CAI区神经元轴突变性胞质aJ见许多脂褐素颗粒沉积，。，Bar=l“mFig．1Shoamwingmildocondensationofehro．matininthewnuclenus(N)noant／atewlipofumemscingranulesinthecytoplaosmofper／kat3n’一onofneuronofshippocintretheapusCAIsmfSTZtreatedrat；Figo2Shoingindepusotatiofteon11eleal。braEinne(N)lysandinocreasefdepositioofolipofuseingpusranulecytoplaraofdegecneratedrneuronfhippocaamfSTZdelnsatretadficcraI：Fig．3artagefapoptnsiswfoeuronofhippofGolgisccamofSTZantedst．Showinginsharactenistic；Ft．margintionandconionhromatinthewnuclebuus(N)nithdilantatioonocisternaedvesicle(G)putheperikaryotreaig4Bar=ShowinglILmneuronaaxoplasmdegenerationithandatdepositioflipofuingranulesinthehippocamofSTZtedra．维普资讯 http://www.cqvip.com

７０　电子显微学报Ｊ．Ｃｈｉｎ．Ｅ１ｅｃｔｒ．Ｍｉｃｍｓｃ．Ｓｏｃ　第２７卷　色质浓聚成较大的不规则团块、边集，核膜不平整或　的突触大小、形态各异，在其中，透明突触小泡密集　有较深的凹陷，呈现细胞凋亡的早期改变（图３）。　显著增多，分布无序。突触前膜和突触间隙尚清晰。　在神经毡内，变性的有髓鞘包裹的轴突中，神经微管　多数突触后膜胞质面上致密的附着斑形态结构异　和神经微丝稀少，排列紊乱（图４）。电镜观察发现　常，或不规则增厚，或断断续续不完整（图５、图６）。　最为独特的是突触结构的异常。与树突和轴突相连　图５，图６模型组海马神经毡内突触结构异常，突触大小、形态各异，其中有大量密集的透明突触小泡（ｓ）。箭头所示为不　规则增厚和断断续续的突触后膜胞质面的致密斑。Ｂａｒ＝１　ｔｔｍ　Ｆｉｇ・５，Ｆｉｇ。６　Ｓｈｏｗｉｎｇ　ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｓｙｎａｐｓｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｐｉｌｅ　ｏｆ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｏｆ　ＳＴＺ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｒａｔ。Ａ　ｇｒｅａｔ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｍａｌｌ　ｃｌｅａｒ　ｓｙｎａｐｔｉｃ　ｖｅｓｉｃｌｅｓ　ｈａｖｅ　ａｇｇｒｅｇａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｙｎａｐｓｅｓ（Ｓ）．Ａｒｒｏｗｈｅａｄｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｒｒｅｇｕｌａｒ　ｔｈｉｃｋｅｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｅｄ　ｍａｃｕｌａ　ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｏｓｔｓｙｎａｐｔｉｃ　ｍｅｍｂｒａｎｅ．Ｂａｒ＝１　ｔｔｍ　３讨论　对神经元的存活非常重要　￣６＿。　根据Ｓｈａｒｍａ　Ｍ等　人的报道，大鼠侧脑室内注　ＡＤ是引起痴呆的最常见病因之一，目前已成为　射ＳＴＺ可以作为研究ＡＤ型神经退行性变的模型使　老年人的第四位死亡原因，其病因和发病机理一直　用。ＳＴＺ的化学名称是Ｎ．ｄ葡萄糖基（２）．Ｎ．亚硝基．　是研究的热点。与ＡＤ痴呆相关的特征性神经病理　早基脲，分子式ｃ　Ｈ。　Ｎ，Ｏ　，分子量是２６５道尔顿。　和分子损伤包括：神经元和神经突触的丢失、ｔａｕ蛋　ＳＴＺ是葡萄糖胺．亚硝基脲复合物，外周血给予ＳＴＺ，　白过度磷酸化形成神经纤维缠结以及邮沉积等。　其代谢产生的细胞毒性产物优先破坏胰岛８细胞，　尽管遗传因素使个体易患ＡＤ或易形成Ａ８的过度　产生糖尿病。尽管细胞毒性作用的精确机制还不清　沉积，但大多数ＡＤ病例并非呈现明显的家族或遗　楚，但ＳＴＺ代谢的烷基化产物能产生活性氧自由基，　传聚积现象，而多以散发形式出现。早期对ＡＤ从　引起氧化应激和ＤＮＡ损伤。成年大鼠侧脑室内注　生物化学、分子和细胞水平上的异常改变分析说明，　射ＳＴＺ可以促使大脑皮层和海马的葡萄糖利用和糖　神经细胞的丢失与死亡前相关基因和信号通路的异　原代谢慢性降低１０％～３０％Ｃ７］，从而导致脑氧化代　常激活、能量代谢障碍、线粒体功能异常、慢性氧化　谢明显下降　，胰岛素受体功能被抑制　和学习、记　应激以及脑血管疾病／脑低灌注有关。并且，功能学　忆、认知、行为以及脑能量平衡的进行性缺陷¨　。　研究显示，在ＡＤ认知功能损伤出现之前或在其发　本实验造模２１天后，水迷宫结果显示，模型组大鼠　病的早期阶段就存在脑葡萄糖利用和能量代谢障　的平均游泳时间和平均游泳距离明显长于对照组，　碍。大量证据表明：胰岛素和胰岛素信号转导机制　表明前者的学习记忆能力下降，但两组大鼠的平均　维普资讯 http://www.cqvip.com

第ｌ期　岳志霞等：脑室内注射链脲佐菌素大鼠海马神经元和突触的超微结构异常　７１　外周血糖水平没有明显差异，说明胰腺Ｂ细胞并不　受影响，与文献报道相符。　目前对ＡＤ型神经退行性疾病的神经内分泌机　制主要强调全身系统性疾病，即２型糖尿病。但根　据ｄｅ　ｌａ　Ｍｏｎｔｅ及其同事们以往的研究表明，通过削　弱脑内胰岛素信号转导机制，可以导致正常大脑出　现ＡＤ中枢神经系统退行性变的许多重要变化，如：　线粒体功能异常、神经元死亡等，并且提出，ＡＤ可能　是一种大脑特异的神经内分泌疾病或者称“３型糖　尿病”　川。本实验电镜超微结构观察结果显示，模　型组海马神经元有不同程度的退行性变和早期细胞　凋亡，以及在核周体和轴突内出现较多脂褐素沉积，　从形态上证实脑室内注射ＳＴＺ可促使大脑提前老　化，诱发ＡＤ。　脑内胰岛素信号转导异常、葡萄糖利用减少可　引起ＡＴＰ大量减少，导致细胞能量不足。因为大部　分能量用于维持神经元的突触传递和突触可塑性，　因此，突触传递减弱是能量利用减少最早期的表现，　随着葡萄糖利用进行性减少，最终可导致突触丢失。　对ＡＤ患者脑颞叶和额叶皮质神经元和突触密度的　定量分析发现，突触密度减少的程度比神经元死亡　的数量高出４８％，说明ＡＤ患者脑存活的神经元中　也存在突触丢失。突触丧失是与ＡＤ认知功能下降　关系最密切的神经生物学因素，突触丧失的结果必　然引起神经元网络功能异常，导致信息传递障碍。　另外，ＡＤ患者不仅有突触数量的改变，突触功能也　受到影响，如与囊泡转运相关的基因产物表达中断，　导致突触囊泡运输障碍¨　。在本实验中，模型组海　马神经毡内突触结构异常，突触大小、形态各异，突　触前递质小泡显著增多聚集，突触后膜胞质面上的　致密斑结构明显异常，从超微结构水平验证了突触　功能丧失是ＡＤ认知功能下降的重要生物学因素。　参考文献：　［１］Ｓｏｎｋｕｓａｒｅ　Ｓ　Ｋ，Ｋａｕｌ　ｃ　Ｌ，Ｒａｍａｒａｏ　Ｐ．Ｄｅｍｅｎｔｉａ　ｏｆ　Ａｌａｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ　ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ－　ｍｅｍａｎｆｉｎｅ，ａ　ｎｅｗ　ｈｏｐｅ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｒｅｓ，２００５，５：１一　ｌ７．　［２］Ｍａｒｋｅｓｂｅｒｙ　Ｗ　Ｒ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｆｒｅｅ　Ｒａｄｉｃａｌｓ　Ｂｉｏｌ　Ｍｅｄ，１９９７，２３（１）：１３４—　１４７．　【３］Ｓｈａｒｍａ　Ｍ，Ｇｕｐｔａ　Ｙ　Ｋ．Ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｉｆｃｕｌａｒ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｃｏｉｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｐｒｏｄｕｃｅｓ　ｂｏｔｈ　ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｒａｉｎ　ａｎｄ　ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ　ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ［Ｊｊ．Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎ，２００１，６８　（９）：１０２ｌ一１０２９．　［４］Ｒｉｖｅｒａ　Ｅ，Ｇｏｌｄｉｎ　Ａ，Ｆｕｌｍｅｒ　Ｎ，Ｔａｖａｒｅｓ　Ｒ，Ｗａｎｄｓ　Ｊ　Ｒ，Ｄｅ　ｌａ　Ｍｏｎｔｅ　Ｓ　Ｍ．Ｉｎｓｕｌｉｎ　ａｎｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ—ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｎａｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｄｅｔｅｒｉｏｒａｔｅ　ｗｉｔｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ：Ｌｉｎｋ　ｔｏ　ｂｒａｉｎ　ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ［Ｊ］．Ｊ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ　Ｄｉｓ。２００５，８：２４７—２６８．　［５］Ｄｅ　ｌａ　Ｍｏｎｔｅ　Ｓ　Ｍ，Ｗａｎｄｓ　Ｊ　Ｒ．Ｒｅｖｉｅｗ　ｏｆ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ａｎｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ａｎｄ　ｍａｌｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｎｅｒｖｏｕｓ　ｓｙｓｔｅｍ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｔｏ　Ａ／ｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．Ｊ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ　Ｄｉｓ，２００５，７（１）：４５　—６１．　［６］Ｓｔｅｅｎ　Ｅ，Ｔｅｒｒｙ　Ｂ　Ｍ，Ｒｉｖｅｒａ　Ｅ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｐａｉｒｅｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ａｎｄ　ｉｎｓｕｌｉｎ－ｈｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｉｎ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ—ｉｓ　ｔｈｉｓ　ｔｙｐｅ　３　ｄｉａｂｅｔｅｓ　［Ｊ］．Ｊ　Ａｌｇｈｅｉｍｅｒ８　Ｄｉｓ，２００５，７（１）：６３—８０．　［７］Ｐｌａｓｃｈｋｅ　Ｋ，Ｈｏｙｅｒ　Ｓ．Ａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｉａｂｅｔｏｇｅｎｉｃ　ｄｒｕｇ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｃｏｉｎ　ｏｎ　ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ　ａｎｄ　ｇｌｙｃｏｇｅｎｏｌｙｔｉｃ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　ａｄｕｌｔ　ｒａｔ　ｂｒａｉｎ　ｃｏｒｔｅｘ　ａｎｄ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｄｅｖ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９３，ｌ１（４）：４７７—４８３．　［８］Ｄｕｅｌｌｉ　Ｒ，Ｓｅｈｒｃｏｋ　Ｈ，Ｋｕｃｓｈｉｎｓｋｙ　Ｗ，Ｈｏｙｅｒ　Ｓ．　Ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ　ｉｎｄｕｃｅｓ　ｄｉｓｃｒｅｔｅ　ｌｏｃａｌ　ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｇｌｕｃｏｓｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔ　［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｄｅｖ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９４，１２（８）：７３７—７４３．　［９］Ｈｏｙｅｒ　ｓ，　Ｓ　Ｋ，Ｌｏｆｉｔｅｒ　Ｔ，Ｓｃｈｌｉｅｂｓ　Ｒ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ａｎ　ｉｎ　ｖｉｖｏ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｓｐｏｒａｄｉｃ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ　ｄｉｅｓａｓｅ［Ｊ］．Ａｎｎ　Ｎ　Ｙ　Ａｃａｄ　Ｓｃｉ，２０００，９２０：２５６　—２５８．　［１０］Ｌａｎｎｅｒｔ　Ｈ，Ｈｏｙｅｒ　Ｓ．Ｉｎｔａｒｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｌｕａｒ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｃｏｉｎ　ｃａｕｓｅｓ　ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ　ｄｉｍｉｎｕｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｌｅａｒｎｉｎｇ　ｎａｄ　ｍｅｍｏｒｙ　ａｂｉｉｌｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｉｎ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｅｎｅｒｇｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｉｎ　ａｄｕｌｔ　ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｂｅｈａｖ　Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，１９９８，１１２（５）：１１９９—　１２０８．　［１１］Ｒｉｖｅｒａ　Ｅ　Ｊ，Ｌｅｓｔｅｒ－Ｃｏｌｌ　Ｎ，Ｓｏｓｃｉａ　Ｓ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｔｒａｃｅｅｒｂｒｌａ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｃｏｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ｔｙｐｅ　３　ｄｉａｂｅｔｅｓ：Ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｔｏ　ｓｐｏａｒｄｉｃ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｅｓａｓｅ［Ｊ］．Ｊ　Ａｌｇｈｅｉｍｅｒｓ　Ｄｉｓ，２００６，　９：１３—３３．　［１２］Ｃｏｌｅｍａｎ　Ｐ　Ｄ，Ｙａｏ　Ｐ　Ｊ．Ｓｙｎａｐｔｉｃ　ｓｌａｕｇｈｔｅｒ　ｉｎ　Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］，Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ　ｏｆ　Ａｇｉｎｇ，２００３，２４：１０２３—１０２７．　维普资讯 http://www.cqvip.com

７２　电子显微学报Ｊ．Ｃｈｉｎ．Ｅｌｅｃｔｒ．Ｍｉｃｍｓｃ．Ｓｏｃ　第２７卷　Ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎ　ａｎｄ　ｓｙｎａｐｓｅ　ｏｆ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｉｎｊ　‘　－　ｅｃｔｉ０ｎ　０Ｉ　ｓｔｒｅｖｔｏｚｏｔｏｃｉｎ　‘　ｎ　‘　ＹＵＥ　Ｚｈｉ．ｘｉａ　，ＣＵＩ　Ｙａｈ—ｊａｎ　，ＷＡＮＧ　Ｐｅｎｇ—ｗｅｎ　－　，ＴＩＡＮ　Ｊｉｎ—ｚｈｏｕ２，ＷＡＮＧ　Ｒｏｎｇ３，ＳＨＥＮＧ　Ｓｈｕ—ｌｉ　（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｂａｓｉｃ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃａｐｉｔａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００６９，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｄｏｎｇｚｈｉｍｅｎ　Ｈｏｓｐｉｔｌ，Ｂｅｉａｊｉｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００７００，Ｃｈｉｎａ；　３．Ｋｅｙ　ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｆｏｒ　ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ　ｄｉｓｅａｓｅｓ　ｏｆ　ｍｉｎｉｓｔｙ　ｏｆｒ　ｅｄｕｃａｔｉｏｎ。Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００５３，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｌｅａｒｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｍｅｍｏｒｙ　ａｎｄ　ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｌ　ｃｈａｎｇａｅｓ　ｏｆ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｍｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｌｙ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ（ＳＴＺ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ　ｏｆ　ＡＤ　ｍｏｄｅｌ，ｔｈｅ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｌｅａｒｎｉｎｇ　ｎｄ　ａｍｅｍｏｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　Ｗａｓ　ｓｕｒｖｅｙｅｄ　ｂｙ　Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ　ｔｅｓｔ，　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｕｌｔｒａ－ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｔｈｉｎ－ｓｅｃｔｉｏｎ　ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｓｗｉｍｍｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｓｗｉｍｍｉｎｇ　ｄｉｓｔａｎｃｅ　ｉｎ　Ｍｏｒｒｉｓ　ｗａｔｅｒ　ｍａｚｅ　ｔｅｓｔ　ｗｅｒｅ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＳＴＺ．Ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ　ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎ　ｏｆ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｃｏｎｄｅｎｓａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍａｒｇｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｒｏｍａｔｉｎ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅａｒ，　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｏｆｐｕｓｃｉｎ　ｇｒａｎｕｌｅｓ，ｄｉｌａｔａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｇｏｌｇｉ，ｃｉｓｔｅｍａｅ　ａｎｄ　ｖｅｓｉｃｌｅｓ　ｉｎ　ｃｙｔｏｐｌｓｍ　ｏｆ　ｐｅｆａｉｋａｒｙｏｎ　ｗｅｒｅ　ｐｒｅｓｅｎｔ．Ｉｎ　ｎｅｕｒｏｐｉｌ，　ｔｈｅ　ｄｙｓｍｏｒｐｈｉｃ　ｓｙｎａｐｓｅｓ　ａｎｄ　ａｘｏｐｌｓｍｉａｃ　ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ．　Ａ　ｇｒｅａｔ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｍａｌｌ　ｃｌｅａｒ　ｓｙｎａｐｔｉｃ　ｖｅｓｉｃｌｅｓ　ｈａｖｅ　ａｇｇｒｅｇａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｙｎａｐｓｅｓ　ａｎｄ　ｉｒｒｅｇｕｌａｒ　ｔｈｉｃｋｅｎｉｎｇ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒｒｕｐｔｅｄ　ｍａｃｕｌａ　ａｄｈｅｒｅｎｃｅ　ｏｆ　ｐｏｓｔｓｙｎａｐｔｉｃ　ｍｅｍｂｒａｎｅ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｓｅｅｎ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＩＣＶ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＳＴＺ　ｃａｎ　ｉｎｊｕｒｅ　ｔｈｅ　ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ　ｃａｕｓｅ　ｕｌｔｒｓｔａｒｕｃｔｕｒｌ　ａａｂｎｏｍａｒｌｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｎｄ　ａｓｙｎａｐｓｅｓ　ａｎｄ　ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ　ｉｍｐａｉｍｅｎｒｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｔｓ・　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’Ｓ　ｄｉｅａｓｓｅ；ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ（ＳＴＺ）；ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ；ｎｅｕｒｏｎ；ｓｙｎａｐｓｅ；ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ