PromegaDNA提取试剂盒的使用方法
一、使用前的准备工作
Proteinase k solution:用无核酸酶的水把蛋白酶K稀释成20mg/ml，按照自己的每次平均使用量分装，储存在-20℃，融化时要在冰上融化，反复冻融会降低Proteinase K的活性
消化液配制：在tube中混合下面各种反应物，使用前放在冰上。
Digestion Solution Master Mix Components Nuclei Lysis Solution 0.5M EDTA (pH 8.0) proteinase K, 20mg/ml RNase A Solution Total Volume Volume per Sample 200μl 50μl 20μl 5μl 275μl Volume for N Samples (N + 1) × 200μl (N + 1) × 50μl (N + 1) × 20μl (N + 1) × 5μl (N + 1) × 275μl Wizard SV Wash solution（洗脱液）的配制：按照瓶子标签上要求的量，添加95%的乙醇到Wizard sv solution 中，做上标记，室温保存。
PromegaDNA提取试剂盒的使用方法步骤（离心机法） 0、将Nuclease-Free Water 放在65℃的水浴锅中
1、 剪取动物组织20mg，分成相同的2份，放在1.5ml的离心管中，
样品中决不能含有软骨组织，否则会阻塞柱子
2、 每份样品中添加275ul先前准备的消化液，确保消化液能够完
全覆盖样品，如果不能覆盖，将样品再剪得小点
3、 把样品放到55℃的水浴锅或加热块中孵育16-18小时（过夜），
蛋白酶K消化过夜后2000g离心，取上清液到1.5ml的离心管中。
4、 向样品中添加250ul的Wizard SV Lysis Buffer,漩涡混匀 5、 处理后的产物尽快进行下面的操作，如果不能进行下面的操作，
应该把它放在-70℃下保存，使用时应该冻融或者放在55℃温和解冻
6、 将收集管做上标记，将柱子放在收集管上，把整个1.5ml离心
管内的溶解产物转移到柱子中。13000g离心3分钟，目的是让基因组吸附在柱子中，如果仍有残留液体，可以重新13000g离心一分钟
7、 倒掉收集管中的液体，把柱子重新放回收集管上
8、 检查一下乙醇是否已经添加到Wizard SV Wash Solution中 9、 每个样品中添加650ul的Wizard SV Wash Solution（真空抽
滤要加800ul），13000离心1分钟 10、 去除溶液，将柱子重新放置在集合管中 11、 重复9-10步3次，（一共需要洗4次）
12、 洗剂结束后，清空收集管中的水13000g离心2分钟
13、 去掉收集管，取相同数量的1.5ml的离心管做上标记，将柱子
将在1.5ml的离心管上，添加250ul65℃的Nuclease-Free
Water 到柱子中，室温孵育2分钟，13000g离心1分钟（要溶液，勿扔）
14、 再在柱子中添加250ul的Nuclease-Free water，室温孵育2
分钟，13000g离心1分钟
15、 扔掉柱子，将收集的纯化的DNA储存在-20℃至-70℃
