江西农业大学学报２０１３，３５（３）：６１５—６１９ ｈｔｔｐ：／／ｘｕｅｂａｏ．ｊｘａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ｅ—ｍａｉｌ：ｎｄｘｂ７７７５＠ｓｉｎａ．ｅｏｍ Ａｃｔａ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｔｉｓ Ｊｉａｎｇｘｉｅｎｓｉｓ Ｉ３；一蜕皮甾酮衍生物前导化合物的 合成、分离及鉴定 陈丽秋，迟德富 ，李晓灿，宇 佳 （东北林业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨１５００４０） 摘要：以１３一蜕皮甾酮为反应物，利用不同催化剂对８一蜕皮甾酮的邻位羟基进行异丙叉化反应，获得３种Ｂ一 蜕皮甾酮的环氧化合物：２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ、２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ和２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉ＿ ａｃｅｔｏｎｉｄｅ。与磷钼酸相比，对甲基苯磺酸吡钠啶盐是甾醇类激素比较理想的异丙叉化反应的催化剂，通过一个 反应可以同时获得３种环氧产物；同时利用薄层层析检测筛选出分离蜕皮甾醇类物质的最佳流动相为氯仿和 甲醇，其中氯仿：甲醇（８：１）分离得到２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ；氯仿：甲醇（４：１）分离得到２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ；氯仿：甲醇（２：１）分离得到２０～ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ。 关键词：Ｂ一蜕皮甾酮；先导化合物；环氧化合物 中图分类号：Ｒ９１７ 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００—２２８６（２０１３）０３—０６１５—０５ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｉｃａｔｆｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｌｅａｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｆ Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ｏｆ １３一ｈｙｄｒ０ｘｙｅｃｄｙｓ０ｎｅ ＣＨＥＮ Ｌｉ－ｑｉｕ，ＣＨＩ Ｄｅ—ｆｕ ，ＬＩ Ｘｉａｏ—ｃａｎ，ＹＵ Ｊｉａ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｎｏｒｔｈｅａｓｔ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａ’ｅｒｂｉｎ １５００４０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｔｈｉｓ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ，ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｅｐｏｘｉｄｅｓ ｏｆ Ｂ—ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ ｗｅｒｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ Ｂ—ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ ａｓ ｔｈｅ ｒｅａｃｔａｎｔ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃａｔａｌｙｓｔｓ ｔｏ ｍａｋｅ ｔｈｅ ｅｐｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｖｉｃｉｎａｌ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ Ｂ—ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ，２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ ａｎｄ ２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｐｈｏｓｐｈｏ—ｍｏｌｙｂｄｉｃ ａｃｉｄ，ｐｙｒｉｄｉｎｉｕｍ Ｐ—ｔ０ｌｕｅｎｅｓｕｌｐｈ０ｎａｔｅ ， ｗａｓ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｅａｔｌｙｓｔａ．Ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｅｐｏｘｉｄｅｓ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ ａｔ ｔｈｅ ｓａｍｅ ｔｉｍｅ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｎ ｅｐｏｘｉｄａｔｉｏｎ ｒｅ－ ａｃｔｉｏｎ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅｓ ｔｏ ｓｅｐａｒａｔｅ ｅｃｄｙｓｉｓ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｂｙ ｔｈｅ ｗａｙ ｏｆ ｔｈｉｎ—ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ— ｐｈｙ（ＴＬＣ），ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ，２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅ— ｔｏｎｉｄｅ ａｎｄ ２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｉｎ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ８：１，４：１ ａｎｄ ２：１． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｂ—ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ；ｌｅａｄ ｃｏｍｐｏｕｎｄ；ｅｐｏｘｉｄｅ Ｂ一蜕皮甾酮（又称为ｐ一蜕皮激素、２０一ＯＨ一蜕皮激素或２Ｏ—ＯＨ一蜕皮甾酮）是一类多羟基甾 酮类化合物，存在于昆虫和多种植物中 。在目前的报道中表明：已从１６０多种植物中检测出含有多羟 基甾酮类化合物，这些化合物都具有蜕皮活性，其中１２０多种蜕皮甾酮类似物的分子结构已经得到证 实。这些已证实的化合物为植物源蜕皮激素衍生物分子结构的获得，及人工合成具有高活性的蜕皮激 素衍生物提供了直接的理论依据 Ｊ。到目前为止已经有很多研究表明，现已鉴定出来的１２０多种蜕皮 甾酮类似物中，有多种化合物对昆虫具有比２０一羟基蜕皮甾酮更高效调节蜕皮作用，或具有更高效的杀 虫作用 。但是，多羟基蜕皮甾酮类似物在昆虫体内及植物中含量都比较低 Ｊ。虽然，目前已有从植物 修回日期：２０１３—０４～０３ 收稿日期：２０１２—１２—２３ 基金项目：国家林业公益性行业科研专项（２０１００４００３—７）和黑龙江省科技攻关项目（ＧＢ０８Ｂ２０２—０３和ＧＢ０９Ｂ２０３—４） 作者简介：陈丽秋（１９８４一），女，研究生，主要从事植物源杀虫剂的提取分离纯化研究； 通讯作者：迟德富，男，教 授，Ｅ—ｍａｉｌ：ｑ１００３２０１１５＠１２６．ｔｏｍ。 ・６１６・ 江西农业大学学报 第３５卷 中成功提取Ｂ一蜕皮甾酮衍生物的相关报道 』，但是，这些方法在应用于工业生产时需要经过组织培养 和添加诱导剂等多道工序，另外Ｂ一蜕皮甾酮类似物的结构复杂，提取过程中极易在酸、碱、酶和热的作 用下分解，从而使获得物提取成本高昂、且杂质成分复杂，不利于产出物的后续应用 Ｊ。因此有必要利 用化学修饰的方法获得Ｂ一蜕皮甾酮的衍生物。目前已有研究人员成功合成ｐ一蜕皮甾酮的乙酸酯类 衍生物和含氮类杂环衍生物，并通过生测鉴定出Ｂ一蜕皮甾酮的２２位羟基是ｐ一蜕皮甾酮发挥高蜕皮 活性的的功能基团ｌ８］。而本文是以Ｂ一蜕皮甾酮（２０一ＥＣＤ）作为反应原料，利用脱水剂对蜕皮甾酮的 邻位羟基进行化学修饰得到３种关键性的蜕皮甾酮衍生物的先导化合物。这３种先导化合物将蜕皮甾 酮的活跃羟基选择性地进行保护，以利于其他基团的修饰，定向的合成其他植物蜕皮甾酮衍生物，为以 后研究药理活性及其构效关系奠定基础。 １材料与方法 １．１仪器设备和实验材料 ＢｒｕｋｅｒＡＲＸ一：３００型核磁共振分析仪测定（ＴＭＳ内标）；ＬＣ—ＭＳＤ—Ｔｒａｐ—ＳＬ型质谱仪测定；旋转蒸 发仪。 Ｂ一蜕皮甾酮（购于福州日冕科技开发有限公司、纯度为９８％）；甲醇、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等均为 天津永大化学试剂有限公司生产的分析纯试剂；薄层分析用硅胶ＧＦ２５４（青岛海立信精细硅胶化工有限 公司）；快速柱层析所用硅胶为Ｈ６０（青岛海立信精细硅胶化工有限公司）。 １．２合成方法 －１ｏ］ １．２．１ ２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ合成方法 在于燥的反应瓶中加入ｐ一蜕皮甾酮１１０ ｍｇ （０．２０８ ｍｍｏ１）Ｂ一蜕皮甾酮，加人干燥丙酮３０ ｍＬ（相对密度０．７８４ ５ ｇ／ｍＬ，约０．４１６ ｔｏｏ１），搅拌下加入 磷钼酸１０ ｍｇ（约０．０４５ １ ｍｍｏ１），反应物在室温条件下不断搅拌，每隔１０ ｍｉｎ取样１次，用薄层层析板 检测反应进程。待用薄层层析检测，显示不出Ｂ一蜕皮甾酮的特定条带时，在反应液中加入０．１２ ｍｏｌｆＬ 的碳酸氢钠溶液终止反应，混合液用氯仿萃取３次，有机相经饱和食盐水洗并收集有机相，将得到的有 机相再经过水洗后用无水硫酸钠干燥过夜，减压蒸出溶剂。 １．２．２ ２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ和２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的合成方法 将１１０ ｍｇ （０．２０８ ｍｍｏ］）Ｂ一蜕皮甾酮溶解在１．０ ｍＬ的甲醇中，再加入干燥丙酮３０ ｍＬ和对甲基苯磺酸钠吡啶盐 １０ ｍｇ，混合物在室温条件下不断搅拌，每隔１０ ｍｉｎ取样１次，用薄层层析板检测反应进程。待在薄层 层析板上检测到香草醛显色条带数量不再增加并且Ｂ一蜕皮甾酮特征条带不再发生变化时，向反应液 中加人水２０ ｍＬ终止反应，用氯仿萃取３次，再将有机相经水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥过夜 后，减压蒸出溶剂。 １．３分离方法 １．３．１流动相的检测参照相关文献［４，７］将石油醚、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、甲醇等５种化合物，按一 定比例配制成１６种展开剂（详细配比见表１），从中优化出Ｂ一蜕皮甾酮类物质的最适展开剂：将分别 用磷钼酸和对甲基苯磺酸钠吡啶盐脱水剂脱水得到的两种反应产物的浓缩液分别用Ｌｉｎｏｍａｔ ５自动点 样，薄层层析板的规格为１０ ｃｍ×１０ ｃｍ，点样量为５ ，将点好样的薄层层析板分别放人不同比例的展 开剂中展开，待溶剂前沿至９５ ｍｍ，取出晾干， ｌ％香草醛一浓流酸溶液显色，１０５ 烘３ ｒａｉｎ， 表１展开剂组分及比例 Ｔａｂ．１ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ 拍照保存，同时根据Ｒｆ值优化展开剂。 １．３．２硅胶柱层析硅胶在烘箱中活化２ ｈ， 展开剂组分 Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ 展开剂比例 Ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ 干燥器中冷却到室温，用流动相充分浸泡，超声 脱气，重力沉降法装柱，用流动相洗出硅胶中的 杂质并平衡，将分别用磷钼酸和对甲基苯磺酸 钠吡啶盐脱水剂脱水得到的两种浓缩液分另４加 入到已经平衡好的硅胶柱中，在不同比例的流 动相中展开，用薄层层析板跟踪流出液的成分，将在薄层层析板上同一位置上显示单一斑点的流出液合 第３期 陈丽秋等：８一蜕皮甾酮衍生物前导化合物的合成、分离及鉴定 ・６１７・ 并，旋转蒸发仪蒸出溶剂，真空干燥器中干燥浓缩液，得到纯白色的固体物质。 １．４结构检测 利用 ＨＮＭＲ和ＭＳ表征物质结构： ＨＮＭＲ在ＢｒｕｋｅｒＡＲＸ一３００型核磁共振分析仪测定，以ＣＤＣＩ 为溶剂，ＴＭＳ为内标，样品浓度：约 ２５ ｍｇ／ｍＬ，温度２０～２５ ｏＣ， ＨＮＲＭ的观察频率分别为３００ ＭＨｚ。 ＇ ● ２研究结果 ２．１薄层层析 用磷钼酸作为Ｂ一蜕皮甾酮异丙叉化反应的催化剂时，反应终止的反应液经过薄层层析板显色可 显示两条条带，其中展开距离最短的为没有参与反应的Ｂ一蜕皮甾酮，用氯仿：甲醇（１：８）作洗脱剂洗 脱、收集留样并干燥后可以获得２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ纯品（得率约为５Ｏ．５１％±０．５０％）， 而用对甲基苯磺酸钠吡啶盐做为Ｂ一蜕皮甾酮的异丙叉化反应的催化剂，通过检测反应进程，发现当反 应进行１ ｈ后，反应液在薄层层析板上可以显示４条带，其中展开距离最短的为没有反应的ｐ一蜕皮甾 酮，用氯仿：甲醇（８：１）作为洗脱剂洗脱、收集留样并干燥后可以获得白色的２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉ— ａｃｅｔｏｎｉｄｅ纯品（得率约为２４．３５％±０．５０％）；用氯仿：甲醇（４：１）作为洗脱剂洗脱、收集留样并干燥后可 以获得纯白色的２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ纯品（得率约为３１．２６％－４－０．５０％）；用氯仿：甲醇（２：１）作 为洗脱剂洗脱、收集留样并干燥后可以获得纯白的２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的纯品（得率约为３２．４９％± ０．５０％），由此可见，通过适当的控制反应进程，以甲基苯磺酸钠吡啶盐作为１３一蜕皮甾酮异丙叉化反应 的催化剂可以同时获得１３一蜕皮甾酮的３种关键性的异丙叉化合物，这３种环氧化合物可以作为合成 其它种蜕皮甾酮衍生物的前导化合物。此外，这３种前导化合物也是进行蜕皮甾酮类衍生物化学合成 的必经路径，因此本实验重点研究这３种前导化合物的合成方法及分离技术，从中优化出既可以减少物 料的损失又可以减少操作步骤，并且适用于工业生产的工艺方法。 表２甾酮类物质在ｌ６种展开剂中展开时的 值 Ｔａｂ．２ Ｒｆ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｓｔｅｒｏｎｅ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ａｍｏｎｇ １６ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｓｏｌｖｅｎｔ ２．２ 甾酮类物质在１６种展开剂中展开时的 值 如表２所示：在石油醚和丙酮、乙酸乙酯和丙酮作为展开剂 展开蜕皮甾酮类物质，展开效果差；以 乙酸乙酯、甲醇作为展开剂展开４种物质时，Ｒ厂的值都介于０．１～０．８，４种物质问 值的差值介于０．０９ ～０．１３，有分离现象，但是 值比较接近，不易将４种物质完全分离开，当用乙酸乙酯和甲醇作为洗脱 剂洗脱时，２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ和２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ同时被洗脱下来；以氯仿和 甲醇作为展开剂时４种物质问 值的差值比较大且差值介于０．１６～０．３７，分离效果较好，优化得出以 氯仿：甲醇（８：１）作为流动相洗脱时可分离得到２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ，以氯仿：甲醇（４：１） 作为流动洗脱开可分离得到２０一ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ，以氯仿：甲醇（２：１）作为流动洗脱可分离得到 ２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ。 ２．３利用ＭＳ、 ＨＮＭＲ对分离得到的物质结构表征结果 对照组（２０．ＥＣＤ）的数据显示：ＨＲ—ＥＳＩ—ＭＳ（ｍ／ｚ）：５０３．８［Ｍ＋Ｎａ］ ，表明其分子量为４８０，同时 ２０一ＥＣＤ从表３可看出， ＨＮＭＲ谱中出现甾醇类物质特有峰值信号，证实表征蜕皮激素衍生物结构的验 证体系可以应用。２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ：ＨＲ—ＥＳＩ—ＭＳ（ｍ／ｚ）：５８３．３０［Ｍ＋Ｎａ］ ，表明其分 ・６ｌ８・ 江西农业大学学报 第３５卷 Ｔａｂ．３ Ｄａｔａ ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ 编号 Ｎｕｍｂｅｒ 名称 Ｎａｍｅ 结构 Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ 表征方法 Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｅａｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ 结果 Ｒｅｓｕｌｔｓ ＭＳ ｍ／ｚ：５０３．８［Ｍ＋Ｎａ］ ６：１．０３，１．１８，１．３４，１．３４，１．５８（ｓ，各 ３Ｈ，．ＣＨ３×５）， ＭＳ ２０一ＥＣＤ ＨＮＭＲ ２．９４（ｔ，１Ｈ，Ｈ—ｌ７）， ３．５５（ｍ，１Ｈ．Ｈ一９）， ３．９３（ｄｄ。１Ｈ一２２） ４．２２（ｂｒｓ，ｌＨ，Ｈ一３１， ４．１７（ｍ，１Ｈ，１Ｈ一２）， ５．８３ｄ，ｌＨ，（ｄ：２．２，Ｈ一７） ＭＳ ｒｎ／ｚ：５８３．３０［Ｍ＋Ｎａ］’ ６：０．７９，０．９９，０．１２，１．２６，１．２８（ｓ，各 ３Ｈ，一ＣＨ３×５）， ２０ ＥＣＤ ２ ２，３：２０，２２一 ＭＳ １．３３，１．４２，１．３３，１．５０（．＞Ｃ（Ｍｅ）２） ２．２７（ｔ，１Ｈ，Ｈ一１７）， ２．７５（ｍ，ｌＨ，Ｈ一５）， ３．６５（ｄｄ，１Ｈ．２２） ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ ＨＮＭＲ ４．２８（ｂｒｓ，１Ｈ，Ｈ一３１， ４．２３（ｍ，１Ｈ，Ｈ一２）， ５．８３ｄ，１Ｈ，（ｄ＝２．２，Ｈ一７） ＭＳ ｍ／ｚ：５４３．９８『Ｍ＋Ｎａ］’ ６：０．８０，０．９９，１．１７，１．２４，１．２６（ｓ，各 ３Ｈ。一ＣＨ３×５１ ｌ－３ｌ、１．４２ ２０一ＥＣＤ ２０，２２一 ＭＳ ＨＮＭＲ （ Ｃ（Ｍｅ）２）， ２．９９（ｍ，１Ｈ，Ｈ一５）， ２．３８（ｍ，ｌＨ，Ｈ一１７）， ３．６３（ｍ，ｌＨ，Ｈ．２２）， ３．９０（ｍ，ｌＨ，Ｈ一２）， ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ ４．０６（ｍ，１Ｈ，Ｈ一３）， ５．８６（ｄ，１Ｈ，ｄ＝２．１，Ｈ一７） ＭＳ ｍ／ｚ：５４３．６４［Ｍ＋Ｎａｌ ８：０．８７，０．９９，１．２４，１．２６，１．４９（ｓ，各 ２０一ＥＣＤ ４ ２，３一 ＭＳ ＨＮＭＲ ３Ｈ．一ＣＨ３×５１． １．３８，１．５７（ Ｃ（Ｍｅ）２）， ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ Ｏ ２．８２（ｔ，１Ｈ，Ｈ一５）， ３．８８（ｂｒｓ，１Ｈ，Ｈ一２２） ４．２１（ｂｓｒ，ｌＨ，Ｈ一２）， ４．２３（ｍ，１Ｈ，Ｈ一３）， ５．８３（ｄ，１Ｈ，ｄ＝２，Ｈ一７） 第３期 陈丽秋等：Ｂ一蜕皮甾酮衍生物前导化合物的合成、分离及鉴定 ・６１９・ 子量为５６０，２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的 ＨＮＭＲ谱与２０一ＥＣＤ的。ＨＮＭＲ谱相比较，不但出现 甾醇类物质特有的峰值，而且还出现了４个峰值为８：１．３３、１．４２、１．３３、１．５０的特殊峰，这４个峰值范围 ＼ 是一，Ｃ（Ｍｅ）２中一ＣＨ３基团的峰值范围，因此可以证实该物质为：２０一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ；２０ ／ ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ ＨＲ—ＥＳＩ—ＭＳ（ｍ／ｚ）：５４３．９８［Ｍ＋Ｎａ］ ，表明其分子量为５１７，２０一ＥＣＤ ２０， ＼ ２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的 ＨＮＭＲ谱与２０一ＥＣＤ的 ＨＮＭＲ谱相比较，６值在０．７～１．６有７个峰，其中５个峰值 为一ＣＨ 基团峰值范围内，其他两个峰值，为一个 Ｃ（Ｍｅ） 基团中两个一ＣＨ，的峰值，此外将２０一 ／ ＥＣＤ ２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的 ＨＮＭＲ谱与２一ＥＣＤ ２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ的 ＨＮＭＲ谱相比较，在６值为 ３．６３处出现一个峰值，８值出现位移，由３．９３变为３．６３，由此证实２２位结构发生环氧化反应；２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ：ＨＲ—ＥＳＩ—ＭＳ（ｍ／ｚ）：５４３．６４［Ｍ＋Ｎａ］ ，表明其分子量为５１７。２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅ— ｔｏｎｉｄｅ的。ＨＮＭＲ谱与２０一ＥＣＤ的。ＨＮＭＲ谱相比较，在８值为３．８８和３．９３处，都出现一个峰值，且位 移差距小，证实在２２位没有发生结构变化，而在８值为１．３８和１．５７处出现两个峰，这两个峰值归属 ＼ ＼ Ｃ（Ｍｅ） 的峰值特征，由此可以确定在ｐ一蜕皮甾酮的２、３位引人 ，Ｃ（Ｍｅ） 基团，证实其该物质 ／ ／ 的结构应该为２０一ＥＣＤ ２，３一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ。 ３讨论 磷钼酸作为脱水剂只能合成一种Ｂ一蜕皮甾酮的环氧产物即２，３：２０，２２一ｄｉａｃｅｔｏｎｉｄｅ。相比较，本文 尝试用对甲基苯磺酸钠吡啶盐作为Ｂ一蜕皮甾酮的异丙叉化反应催化剂，通过实时控制反应进程，可以同 时获得Ｂ一蜕皮甾酮的３种关键性的异丙叉化合物，即可以减少物料的损失又可以大大减少操作步骤。 闰竞宇等 ］的研究表明可以采用丙酮、乙酸乙酯作为展开剂，分离结果可行。但在本实验中通过 展开剂的优化，发现石油醚和丙酮、乙酸乙酯和丙酮展开剂的极性小，很难分离甾酮类物质；而乙酸乙酯 和甲醇在分离这３种环氧化合物时，各物质的 值很接近，分离效果与氯仿和甲醇混合液相比不是很 理想；并最终确定氯仿和甲醇为分离甾酮类物质的最佳流动相。 蜕皮甾酮结构复杂，反应需要在温和的条件下进行，本研究曾试图利用强酸做脱水剂，结果失败，与 强酸反应蜕皮甾酮的结构将很快分解。且在试验过程中所用到的试剂必须经过干燥处理，试剂干燥是 影响试验结果的关键因素。 通过对蜕皮甾酮衍生物合成过程中的关键中间体的合成过程和分离过程的优化，获得一种高效、简 单、经济的合成蜕皮甾酮衍生物中间体的合成、分离技术及纯化的方法。通过化学修饰提高蜕皮甾酮衍 生物活性的是一个不断突破和改进的过程，因此利用化学修饰的手段获得高活性蜕皮甾酮衍生物还有 很大的研究空间。本文重在尝试寻找在Ｂ一蜕皮甾酮分子结构中４个邻位羟基环氧化处理的同时为进 一步获得更多活性的蜕皮甾酮衍生物奠定基础。 参考文献： ［１］胥秀英，郑一敏，王龙．植物蜕皮激素的研究进展［Ｊ］．生物学杂志，２００５，２２（２）：１２—１４． ［２］迟德富，苗建才．昆虫生长调节剂及应用技术［Ｍ］．哈尔滨：黑龙江省科学技术出版社，２００５． ［３］闰竟宇，李铣，程卯生．Ｂ一蜕皮甾酮的分离制备及其结构修饰［Ｄ］．沈阳：沈阳药科大学，２００５． ［４］吕应年，邓亦峰，李彩虹，等．常压硅胶柱层析分离制备高纯贝壳杉烷型二萜［Ｊ］．化学与生物工程，２００６，２３（９）：６０—６２． ［５］王丽丽，王坤波一，黄建安，等．茶叶中儿茶素薄层色谱分离所用展开剂的优化［Ｊ］．湖南农业大学学报：自然科学版， ２０１２，３８（１）：１０２—１０５． ， ［６］王秋红，杨柳，姜海，等．怀牛膝中甾酮类成分的分离与鉴定［Ｊ］．中医药学报，２０１２，４０（１）：６９—７１． ［７］王强，俞祥生．１９种资源植物中Ｂ一蜕皮激素的含量测定［Ｊ］．中国医药大学学报，２００９，２１（３）：２２９—２３１． ［８］Ｓｕｋｓａｍｒａｍ Ａ，Ｐａｔｔａｎａｐｒａｔｅｅｐ Ｐ，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ ２０一ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ ｐａ￣ｉｌａ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｓｏｍｅ ｍｉｎｏｒ ｅｃａｒｒｓｔｅｒｏｉｄｓ ａｎｄ ａｎａｌｏｇｕｅｓ［Ｊ］，Ｔｅｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９５，５１（３８）：１０６３３—１０６５０． ［９］Ｏｄｉｎｏｋｏｖ Ｖ Ｎ，Ｇａｌｙａｕｔｄｉｎｏｗ Ｉ Ｖ．Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ２０一ｈｙｄｒｏｘｙｅｃｄｙｓｏｎｅ ａｃｅｔｏｎｉｄｅｓ ｉｎｔｏ ｐｏｄｅｃｄｙｓｏｎｅ Ｂ［Ｊ］．Ｒｕｓｓｉａｎ Ｊｏｕｒ－ ｎａｌ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００３，３９（７）：９５２—９５６． ［１０］Ｓｕｋｓａｍｒａｒｎ Ａ，Ｐａｔｔａｎａｐｒａｔｅｅｐ Ｐ，Ｔａｎａｃｈａｔｃｈａｉｒａｔａｎａ Ｔ，ｅｔ ａ１．Ｃｈｅｍｉｃｌａ ｍｏｄｉｉｆｃａｔｉｏｎｓ ａｔ ｔｈｅ ２２一ｈｙｄｒｏｘｙ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｅｃｄｙｓｔｅ． ｒｏｉｄｓ ａｈｅｍａｔｉｖｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｌａ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｈｉｇｈ ｍｏｕｌｔｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．Ｉｎｓｅｃｔ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００２，３２： １９３—１９７
