药用植物药效成分合成的转录因子研究进展

・３１００・　中草焉Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　●　综述　●　药用植物药效成分合成的转录因子研究进展　高珂，王玲，吴素瑞，隋春　中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京　１００１９３　摘要：大多药用植物的药效成分为植物本身的次生代谢产物，包括生物碱、萜类、类黄酮、酚类、苷类等。植物体内及体　外环境条件会影响这些次生代谢产物的合成，导致其合成量的增加或减少，或是影响同类代谢产物不同单体成分的合成与否　及合成量。目前所知次生代谢产物合成的机制有转录、转录后等多种形式，其中转录研究较多。综述了药　用植物类黄酮、生物碱、萜类等活性成分生物合成相关的转录因子研究进展，为利用转录控制和提高药用植物药效成分　合成的研究与应用提供借鉴。　关键词：转录因子；药用植物；活性成分；次生代谢产物；黄酮类；生物碱；萜类　中图分类号：Ｒ２８２．１　文献标志码：Ａ　文章编号：０２５３—２６７０（２０１５）２０—３１００—０９　Ｄｏｈ　１０．７５０１／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３—２６７０．２０１５．２０．０２４　Ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｒ’ａｎｓｃｒｉｐｔｉＯｎａｌ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ　ＧＡＯ　Ｋｅ，ＷＡＮＧ　Ｌｉｎｇ，ＷＵ　Ｓｕ－ｒｕｉ，ＳＵＩ　Ｃｈｕｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　Ｐｌａｎｔ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ＆Ｐｅｋｉｎｇ　Ｕｎｉｏｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｂｅｉｊ　ｉｎｇ　１００１９３，Ｃｈｉｎａ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍｏｓｔ　ｏｆ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ　ａｒｅ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ，　ｐｈｅｎｏｌｓ，ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ａｎｄ　ＳＯ　ｏｎ．Ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　ｉｓ　ｎｏｔ　ｏｎｌｙ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｐｌａｎｔ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｂｕｔ　ａｌｓｏ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｆａｃｔｏｒｓ，ｌｅａｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｑｕａｎｔｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ　ｍｏｎｏｍｅｒ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ａｔ　ｐｒｅｓｅｎｔ，ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　ｐｏｓｔ—ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ　ｈａｖｅ　ｂｅｅｎ　ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．Ｍｏｒｅ　ａｄｖａｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ａｃｈｉｅｖｅｄ　ｉｎ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｐａｐｅｒ　ｒｅｖｉｅｗｓ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ　ｏｎ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｌａｖｏｎｏｉｆｄｓ，ａｌｋａｌｏｉｄｓ，ｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ，ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗｉｌｌ　ｂｅ　ｕｓｅｆｕｌ　ｆｏｒ　ｕｒｆｔｈｅｒ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ　ｉｎ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ；ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ；ａｃｔｉｖｅｓ　ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ；ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ａｌｋａｌｏｉｄｓ；ｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ　转录因子（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ，ＴＦ）是一种具　有特殊结构、能基因表达功能的蛋白质分子，　也称为反式作用因子。转录因子通过识别和结合基　位点以及核定位信号等功能区域，这些功能区域决　定转录因子的功能和特性。转录因子对基因表达的　有正和负之分，如长春花　因启动子区的顺式作用元件，启动和基因表达。　植物中的转录因子分为２种，一种是非特异性转录　因子，非选择性地基因的转录表达；另一种是　特异性转录因子，能够选择性某种或某些基因　的转录表达。后一种转录因子研究得较多。典型的　转录因子含有ＤＮＡ结合区、转录区、寡聚化　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ（Ｌ．）Ｇ　Ｄｏｎ中转录因子ＯＲＣＡ２　可直接结合ＳＴＲ启动子，正向萜类吲哚生物碱　（ＴＩＡｓ）生物合成途径中的关键酶基因表达ｌＪ　Ｊ，而　转录因子ＺＣＴｓ可抑制转录因子ＯＲＣＡｓ表达Ｌ２Ｊ。但　转录因子对于代谢产物合成的正和负，即　促进和抑制代谢产物合成的转录因子对于基因表　收稿日期：２０１５－０５—０８　基金项目：四川省“十二五”农作物及畜禽育种攻关项目（２０１１ＮＺ００９８．１２．１１）；药植所创新团队发展计划；中医药行业科研专项（２０１４０７００５）　作者简介：高通信作者隋珂（１９９０一），女，硕士研究生，研究方向为药用植物基因资源和次生代谢研究。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｚｚｚｋｇｋ＠１６３．ｔｏｍ　春，　ｉＪ　宄员，主要从事药用植物基因资源和次生代谢研究。Ｔｅｌ：（０１０）５７８３３３６３　Ｅ—ｍａｉｌ：ｃｓｕｉ＠ｉｍｐｌａｄ．ａｃ．ｃｎ　中草焉Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２Ｏ期２０１５年ｌ０月　・３１０１・　达的方式并不完全一致，有些转录因子对于抑　制酶基因表达的因子进行负，则是对代谢　儿基二磷酸（ＧＧＰＰ）１生成阶段；萜类生成及修饰　阶段【】　】。现己发现的萜类合成的转录因子主要　产物合成的正。此外，转录因子既可以单独作　用于靶基因启动子，也可以与其他蛋白形成复合体　后与靶基因启动子结合，如拟南芥中的ＴＴ２（ＭＹＢ）．　ＴＴ８（ｂＨＬＨ）．ＴＴＧ１（ＷＤ４０）作为复合体原花　有ＡＰ２类、ＷＲＫＹ类、锌指类、ｂＺＩＰ类等。　１．１　ＡＰ２／ＥＲＦ类转录因子　ＡＰ２／ＥＲＦ是一个庞大的转录因子家族，也称　ＡＰ２　ＲＥＢＰ，含有由６０￣７０个氨基酸组成的ＡＰ２／ＥＲＦ　青素结构基因（ＢＡＮ）表达Ｌ３Ｊ；还有一些转录因子作　用于其他转录因子，通过改变其他转录因子的作用　而起到作用，如长春花中的ＣｒＭＹＣ２基因，通　结构域而得名，是植物特有的一类转录因子。这个家　族中的成员参与多种生物学过程，包括植物生长发育、　损伤、病菌防御、干旱等环境胁迫响应等。另外，　过与转录因子ＯＲＣＡ３结合，控制ＯＲＣＡ３基因的表　达，从而长春花生物碱的合成【４Ｊ。　药用植物药效成分的合成与研究己越来越　备受关注。合成生物学的兴起，更掀起了药用植物　代谢途径和研究的热潮。在代谢途径酶基因克　隆和功能分析方面【５　】、利用酵母等宿主合成药用植　物代谢产物方面［７－１０１，已取得了显著进展。以往关于　转录因子方面的综述，或集中在某一植物上，如长　春花、红豆杉等；或集中于某一类转录因子上，如　ＷＲＫＹ类转录因子、ＭＹＢ类转录因子、ｂＨＬＨ（ｂａｓｉｃ　Ｈｅｌｉｘ—Ｌｏｏｐ．Ｈｅｌｉｘ）类转录因子等。本文重点关注药　用植物转录因子研究方面的最新成果，就药用植物　药效成分合成的转录研究进展进行综述，为深　入研究药用植物药效成分转录因子的机制，并　将其应用于药效成分合成的生物工程中提供参考。　１萜类代谢的转录因子　以萜类为主要药效成分的药用植物包括红豆杉　Ｔａｘｕｓ　ｃｈｉｎｅｓｉｓ　ｆＰｉｌｇｅｒ）Ｒｅｈｄ．、黄花蒿Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ａｎｎｕａ　Ｌ．、人参Ｐａｎａｘ　ｇｉｎｓｅｎｇ　Ｃ．Ａ．Ｍｅｙ．、柴胡Ｂｕｐｌｅｕｒｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ　ＤＣ．等。萜类成分包括单萜、二萜、倍半萜、　三萜及其衍生物，如单萜柠檬烯、芳樟醇、芍药苷等；　倍半萜青蒿素、顶羽菊素、雷公藤康碱等；双萜雷公　藤甲素、紫杉醇、长春碱、银杏内酯等；三萜人参皂　苷、柴胡皂苷、白桦酸等。绝大多数萜类化合物具有　较高的药用价值，如抗肿瘤药物紫杉醇、抗疟疾特效　药物青蒿素、抗炎药物雷公藤内酯、防癌化合物柠檬　烯、血小板活化因子拮抗剂银杏内酯以及防治心脑血　管疾病的首选药物三七总皂苷等［１１－１２］。目前，萜类代　谢途径已基本清晰。植物萜类的生物合成含有２条途　径：甲羟戊酸（ＭＶＡ）途径和２一Ｃ＿甲基－Ｄ一赤藻糖醇．　４．磷酸（ＭＥＰ）途径，分为３个阶段：Ｃ　前体『焦磷　酸异戊烯酯（ＩＰＰ）］及其双键异构体［焦磷酸二甲烯　丙酯（ＤＭＡＰＰ）］生成阶段；直接前体［法尼基二磷　酸（ＦＰＰ）、栊牛儿基二磷酸（ＧＰＰ）、栊牛儿基栊牛　ＡＰ２／ＥＲＦ类转录因子参与水杨酸（ＳＡ）、茉莉酸（ＪＡ）、　乙烯、脱落酸（ＡＢＡ）等多种信号转导途径　引。　利用酵母单杂技术从黄花蒿分离到２个ＡＰ２类　转录因子ＡａＥＲＦ１和ＡａＥＲＦ２，经凝胶迁移实验　（ＥＭＳＡ）证实它们可分别与紫穗槐一４，１１．二烯合酶　（ＡＤＳ）和下游Ｐ４５０单加氧酶ＣＹＰ７１ＡＶ１启动子区　域中的ＣＢＦ２和ＲＡＡ元件结合。在烟草中瞬时表　达ＡａＥＲＦ１和ＡａＥＲＦ２，可提高ＡＤＳ和ＣＹＰ７１ＡＶ１　转录水平，增加青蒿素和青蒿素酸的量。相反，ＲＮＡ　干扰（ＲＮＡｉ）技术抑制ＡａＥＲＦ１和ＡａＥＲＦ２表达能　够使青蒿素和青蒿素酸的量下降。上述结果表明　ＡａＥＲＦ１和ＡａＥＲＦ２可正向青蒿素的合成　制。　此外，在青蒿中发现１个在表皮毛特异表达的ＡＰ２　类转录因子ＡａＯＲＡ。ｑＲＴ－ＰＣＲ证实ＡａＯＲＡ的表达　模式与ＡＤＳ、ＣＹＰ７１ＡＶ１和双键还原酶２（ＤＢＲ２）　相似。对ＡａＯＲＡ基因过表达或抑制，可明显上调　或下调青蒿中ＡＤＳ、ＣＹＰ７１ＡＶ１、ＤＢＲ２的表达水　平，可见ＡａＯＲＡ转录因子也能够正向青蒿素　的合成　。　从长春花中克隆到了控制ＴＩＡｓ合成相关基因表　达的ＡＰ２／ＥＲＦ类转录因子ＯＲＣＡ１、ＯＲＣＡ２和　ＯＲＣＡ３。ＯＲＣＡ２可以和ＴＩＡｓ合成途径中关键酶异　胡豆苷合成酶（ＳＴＲ）的启动子结合，特异性激活　ＳＴＲ的表达，使长春碱的产量增加ｕ酬。ＯＲＣＡ３的启　动子区域中含有茉莉酸诱导响应元件（ＪＥＲＥ），在ＪＡ　诱导下，能够增强参与ＴＩＡｓ合成的基因色氨酸脱羧　酶（ＴＤＣ）、ＳＴＲ、异胡豆苷Ｄ一糖苷酶（ＳＧＤ）、细　胞色素Ｐ４５０还原酶（ＣＰＲ）的表达Ｉｌ　＂】以及色氨酸　和色胺的合成，可见ＯＲＣＡ３能够诱导吲哚前体的代　谢合成Ｉｌ引，并且在ＴＩＡｓ合成途径中发挥重要作用，　其过量表达可以增加ＴＩＡｓ的产量Ｌｌ　。　东北红豆杉Ｔａｘｕｓ　ｃｕｓｐｉｄａｔｅ　Ｓ．ｅｔ　Ｚ．中发现的　与ＡＰ２家族其他的转录因子具有很高同源性的　ＴｃＡＰ２，能够在茉莉酸甲酯（Ｍｅ］Ａ）诱导下表达，　・３１０２・　中草１ｓ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　而ＭｅＪＡ可以诱导并增强紫杉醇合成途径中关键酶　基因的表达，进而增加东北红豆杉中活性成分的量　。１．３　ｂＨＬＨ类转录因子　ｂＨＬＨ类转录因子是植物中最大的转录因子家　族之一，具有重要的生物学功能。ｂＨＬＨ蛋白的Ｎ　戴怡龄等＿２Ｉ＿发现了红豆杉中另１个ＡＰ２类转录　因子ＴｃＤＲＥＢ，也具有典型的ＡＰ２结构域。ＴｃＤＲＥＢ　能够与红豆杉异戊二烯代谢途径产物紫杉醇的合成　途径中的ＴＳ、１０Ｂ、１３Ｇｔ和５　０【４个关键酶的启动子　及萜类合酶（ＴＳ）基因的启动子区中ＭｅＪＡ响应元　件ＧＣＣ—Ｂｏｘ结合，可见ＴｃＤＲＥＢ转录因子的　末端含有螺旋．环一螺旋结构域和１个碱性结构域，　是ＤＮＡ的识别和结合所必需的。同时，研究表明　ｂＨＬＨ蛋白必须形成同源二聚体或异源二聚体后才　能特异性地与ＤＮＡ六聚体结合。ｂＨＬＨ转录因子在　植物的生长发育、抗逆性和信号转导等方面发挥着　重要作用［　。　作用可能与红豆杉异戊二烯代谢途径产物紫杉醇的　合成相关，且受信号分子ＭｅＪＡ的影响。　１，２　ＷＲＫＹ类转录因子　ＷＲＫＹ类转录因子是植物所特有的，其Ｎ端　至少包含１个高度保守的以“ＷＲＫＹＧＱＫ”为特征　的ＷＲＫＹ结构域。这一结构域能专一地与靶标基　因启动子区中的ｗ盒［（Ｔ）（Ｔ）ＴＧＡＣ（Ｃ／Ｔ）］序列　结合，激活下游基因的表达，从而植物的各种　生理活动。其Ｃ端是１个典型的锌指结构，即Ｃ２Ｈ２　或Ｃ，ＨＣ。根据其结构域的数目及锌指结构的类型　可将ＷＲＫＹ转录因子分为３大类群：第ｌ类含有２　个ＷＲＫＹ结构域，锌指结构类型为Ｃ２Ｈ２型；第２　和第３大类群ＷＲＫＹ转录因子只含有１个ＷＲＫＹ　结构域，锌指结构分别为Ｃ２Ｈ２和Ｃ２ＨＣ型。该转录　因子广泛参与植物的抗病、抗旱等逆境的，在　细胞代谢和防卫反应中具有重要的作用Ｌ２引。　青蒿素合成过程中的关键酶倍半萜合酶ＡＤＳ能够　促进青蒿素的生物合成。青蒿中分离出的ＡａＷＲＫＹ１　能够与ＡＤＳ启动子区域中的顺式作用元件Ｗ－ｂｏｘ结　合，从而激活其表达。同时，ＡａＷＲＫＹ１　ｃＤＮＡ在青　蒿叶片中的瞬时表达可明显激活青蒿素合成途径中大　多数基因的表达。由此证实ＡａＷＲＫＹ１转录因子参　与青蒿素合成，并且ＡＤＳ是ＡａＷＲＫＹ１的靶基　因【２３Ｊ。杨致荣等　发现长春花ＴＩＡｓ合成途径中的一些　主要酶基因的启动子序列中均含有Ｗ－ｂｏｘ顺式元　件，推测到长春花中ＷＲＫＹ类的ＣｒＷＲＫＹ转录因子　可能参与ＴＩＡｓ合成。发现的４７个ＣｒＷＲＫＹ转录　因子中，约１／３以上ＣｒＷＲＫＹ的表达受ＭｅＪＡ和真菌　诱导子（ＹＥ）的，表明它们可能参与萜ＴＥＡｓ的　合成和逆境胁迫反应，因为长春花ＴＩＡｓ的生物合成受　ＹＥ和ＭｅＪＡ等植物激素诱导。同时，还比较分析了长　春花野生型毛状根、ＴＤＣｉ转基因毛状根和ＲｅｂＩ－Ｉ／Ｆ转　基因毛状根中ＣｒＷＲＫＹ基因表达谱，发现ＣｒＷＲＫＹ　可能参与对毛状根中生物碱合成的前体物质变化的响　应以及下游某些生物碱合成积累的。　利用ＳＴＲ合成酶基因启动子中的Ｇ－ｂｏｘ，从长春　花ｃＤＮＡ文库中分离出１个编码ｂＨＬＨ类转录因子的　ＣｒＭＹＣ１的ｃＤＮＡ。在长春花悬浮细胞中，ＣｒＭＹＣ１　ｍＲＮＡ表达水平受真菌诱导子和ＪＡ的影响，推测　ＣｒＭＹＣ１可能参与上述信号应答相关的基因表达调　控　。在长春花中发现的另１个很重要的ｂＨＬＨ类转　录因子ＣｒＭＹＣ２是ＭｅＪＡ应答基因ＯＲＣＡ３表达的主　要激活因子，ＣｒＭＹＣ２在体外可结合到ＯＲＣＡ３中ＪＥＲ　的定性序列，并通过该序列激活报告基因的表达。当　降低ＣｒＭＹＣ２的表达水平时，ＯＲＣＡ３和ＯＲＣＡ２的　转录因子表达水平也明显下降。由此说明ＣｒＭＹＣ２　转录因子通过调节ＯＲＣＡ类基因表达进而长春　花中响应ＭｅＪＡ的萜类生物碱的量【４＿。红豆杉中ｂＨＬＨ　转录因子ＴｃＪＡＭＹＣ可与紫杉醇通路相关基因启动子　的Ｅ．ｂｏｘ结合进而激活启动子。若将ＴｃＪＡＭＹＣ基因　与代谢工程相结合并应用于红豆杉悬浮细胞培养，将　有利于提高紫杉醇的产量［　】。　１．４　ｂＺＩＰ类转录因子　具有ｂＺＩＰ结构域的碱性亮氨酸拉链转录因子　是真核生物转录因子中最大且最保守的类型之一。　ｂＺＩＰ转录因子是通过其碱性亮氨酸拉链结构域命　名的。ｂＺＩＰ结构由１个接近亮氨酸拉链的富含碱性　氨基酸的区域组成。亮氨酸拉链的特征是空间上每　隔７个氨基酸残基出现１个亮氨酸残基，亮氨酸拉　链形成１个两亲的螺旋结构，该结构参与ｂＺＩＰ蛋白　与ＤＮＡ结合之前的二聚体化。ｂＺＩＰ转录因子与植　物抵抗各种非生物胁迫以及植物发育与生理代谢过　程密切相关Ｌ２　。　以ＳＴＲ基因启动子中的Ｇ—ｂｏｘ为诱饵，从长春　花ｃＤＮＡ库中分离出编码ｂＺＩＰ类转录因子ＣｒＧＢＦ　的ｃＤＮＡ：ＣｒＧＢＦ１和ＣｒＧＢＦ２。ＣｒＧＢＦ１与ＳＴＲ启　动子中的Ｇ—ｂｏｘ结合能力强于与ＴＤＣ启动子中的　Ｇ。ｂｏｘ结合能力，ＴＤＣ基因编码ＴＩＡｓ合成途径中　的另一个酶。实验表明ＣｒＧＢＦ１和ＣｒＧＢＦ２能够结　中草焉Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　合于ＳＴＲ启动子中的Ｇ—ｂｏｘ，负萜类生物碱合　成基因ＳＴＲ的表达Ｌ２　。　植物中绝大多数ＭＹＢ蛋白是Ｒ２Ｒ３型。ＭＹＢ类转　录因子在植物体内具有广泛的生物学功能，如参与　１．５锌指类转录因子　锌指蛋白是一类广泛存在于真核生物体中的重　要转录因子并且含有特殊的ＤＮＡ结合序列，　锌指的重复个数一般与ＤＮＡ结合能力有关。锌指　类转录因子在植物的生长发育过程中起着重要作　用。在研究长春花中ＳＴＲ和ＴＤＣ基因表达的　分子机制时，发现了锌指蛋白家族ＺＣＴ１、ＺＣＴ２、　初生和次生代谢反应、细胞形态与模式建成、植物　生长发育、对生物和非生物胁迫的应答等Ｌ３　。　赵海霞等　５Ｊ采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ分析了苦荞　Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ　ｔａｔａｒｉｃｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ．黄酮类合成途径　中关键酶基因（ＰＡＬ、ＣＨＩ、ＦＬＳ）和ＭＹＢ转录因　子基因ＦｔＭｙｂ１、ＦｔＭｙｂ２、ＦｔＭｙｂ３的相对表达水平。　结果表明，苦荞种子萌发过程中，子叶中黄酮的积　ＺＣＴ３。这些蛋白结合于ＴＤＣ和ＳＴＲ启动子中的特　定序列，并抑制启动子的活性。此外，ＺＣＴ蛋白可　抑制ＡＰ２／ＥＲＦ转录因子ＯＲＣＡｓ的活性，且酵母提　取物和ＭｅＪＡ能够快速诱导ＺＣＴ基因表达。上述结　果表明ＺＣＴ转录蛋白能够负长春花中受外界　因素诱导的次级代谢Ｌｊ…。　２黄酮类代谢的转录因子　黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的多酚　类次生代谢产物。以黄酮类为主要药效成分的药用　植物有黄芩Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ　ｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓ　Ｇｅｏｒｇｉ、三七　Ｐａｎａｘ　ｎｏｔｏｇｉｎｓｅｎｇ（Ｂｕｒｋ．１　Ｆ．Ｈ．Ｃｈｅｎ、银杏Ｇｉｎｋｇｏ　ｂｉｌｏｂａ　Ｌ．、淫羊藿Ｅｐｉｍｅｄｉｕｍ　ｂｒｅｖｉｃｏｒｎｕ　Ｍａｘｉｍ．、水　飞蓟Ｓｉｌｙｂｕｍ　ｍａｒｉａｎｕｍ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔｎ．等。黄酮类药效　成分包括大豆异黄酮、黄芩黄酮、槲皮素、淫羊藿　苷、水飞蓟素等。同时，黄酮类是植物的主要显色　物质，具有很强的生物活性，是一种天然的抗氧化　剂，具有抗衰老、增强免疫力、抗癌防癌的作用Ｌ３　。　黄酮类化合物合成代谢途径中的相关基因分为２　类：一类是编码酶的结构基因，另一类是基因。　黄酮类化合物是一类由苯丙素起始的植物次生代谢　物，其合成途径中关键酶依次主要有查耳酮合成酶　（ＣＨＳ）、查耳酮异构酶（ＣＨＩ）、苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）、　黄酮醇合成酶（ＦＬＳ）、二氢黄酮醇还原酶（ＤＦＲ），其　中ＤＦＲ是花青素合成途径中的关键酶＿３引。目前己分离、　鉴定了多个黄酮类次生代谢的转录因子，主要包　括编码ＭＹＢ、ＭＹＣ、ｂＺＩＰ、ＷＤ４０蛋白等基因家族，　其中对ＭＹＢ转录因子研究较为深入　引。　２．１　ＭＹＢ转录因子　ＭＹＢ转录因子是指含有保守的ＭＹＢ基序的一　类转录因子，每个ＭＹＢ基序含有５１～５２个氨基酸　残基，３个保守的色氨酸残基。每个ＭＹＢ结构域　会折叠成的疏水ＨＴＨ形式与ＤＮＡ大沟结合。ＭＹＢ　蛋白根据其含有ＭＹＢ结构域的数量，可将其分为　Ｒ１蛋白、Ｒ２Ｒ３蛋白、Ｒ１Ｒ２Ｒ３蛋白以及４Ｒ蛋白，　累与ＦｔＭｙｂ３的表达呈显著正相关，与ＦｔＭｙｂ２的表　达呈显著负相关，与ＦｔＭｙｂ１的表达没有显著相关　性。而且ＣＨＩ可能是ＦｔＭｙｂ２和ＦｔＭｙｂ３的激活或　抑制转录的效应基因。聚类分析发现，ＦｔＭｙｂｌ、　ＦｔＭｙｂ２与己证实的与花青素相关的ＭＹＢ转录　因子聚为一类，ＦｔＭｙｂ３可以与己证实的与黄酮醇调　控相关的ＭＹＢ转录因子聚为一类。综上所述，参　与苦荞黄酮合成的关键酶基因和ＭＹＢ转录因子之　问存在显著的相关性关系，但是苦荞芽期黄酮合成　与ＭＹＢ转录因子及关键酶关系复杂，有待进一步　研究。虎萌＿ｊ刨分析了来自苦荞的ＦｔＭｙｂ１和ＦｔＭｙｂ２　转录因子对转基因烟草黄酮类化合物代谢途径关键　酶基因表达的影响。运用紫外．可见分光光度法检测　了转基因烟草叶片中总黄酮量的变化。分析表明，　ＦｔＭｙｂ１和ＦｔＭｙｂ２可显著增强ＰＡＬ、ＣＨＩ基因的表　达，完全抑制ＦＬＳ基因的表达，则ＦｔＭｙｂ１和ＦｔＭｙｂ２　可能通过抑制黄酮醇支路，增加花青苷支路流量，　而提高总黄酮积累。　伍狲Ｌｊ／ｌ以黄芩为研究对象，Ｂｌａｓｔ比对发现了ｌ８　个可能的黄芩ＭＹＢ转录因子。通过将黄芩ＭＹＢ转　录因子候选基因、拟南芥Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈａｌｉａｎａ　ｆＬ．）　Ｈｅｙｎｈ．ＭＹＢ转录因子以及其他植物功能已知的　ＭＹＢ转录因子的保守基因进行系统发育分析，其中　部分ＳｂＭＹＢ可能与黄酮类化合物代谢相关。同时外　源ＡＢＡ处理可下调黄芩幼苗中黄酮类化合物的生物　合成及激活过程，而ＳｂＭＹＢ７／８在ＡＢＡ处理后表达　量均发生变化，说明它们可能受ＡＢＡ。　２．２　ｂＨＬＨ类转录因子　在植物中，ｂＨＬＨ家族的转录因子既可单独结　合ＤＮＡ，又可与ＭＹＢ转录因子相互作用来调节黄　酮类的合成Ｌｊ　。如玉米Ｚｅａ　ｍａｙｓ　Ｌ．中的ＺｍＣ１ＭＹＢ　和ＺｍＢ　ｂＨＬＨｓｌｊ　、矮牵牛花Ｐｅｔｕｎｉａ　ｈｙｂｒｉｄａ　Ｖｉｌｍ中　ＮＡ２ＭＹＢ和ＪＡＦ１３　ｂＨＬＨｓ［３９］，均通过蛋白质之间的　相互作用，来花青素的合成。在金鱼草　・３１０４・　＿Ｐ草１ＩＢ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　Ａｎｔｉｒｒｈｉｎｕｍ　ｍａｊｕｓ　Ｌ．中，将分别编码ｂＨＬＨ和ＭＹＢ　转录因子家族的ＤＥＬ和Ｒｏｓｌ基因转入油菜中，转基　因株系中不仅花青素的量有所增加，其抗氧化能力　也大大增强【４…。在杨梅Ｍｙｒｉｃａ　ｒｕｂｒａ　Ｓｉｅｂ．ｅｔ　Ｚｕｃｃ．果　实花青苷合成研究中，Ｌｉｕ等　发现ＭｒｂＨＬＨ１　可与ＭｒＭＹＢ　１形成转录复合体，通过选择性激活结　构基因活性而促进花青苷的积累。　酮类化合物合成途径，同时还具有表皮细胞建　ＭｔＷＤ４０—１基因突变后，植物酚类代谢过程受到抑　制，根部的异黄酮合成也减少，可见ＭｔＷＤ４０．１转　录因子可能参与植物中酚类的代谢过程如原花色　素、表儿茶酸还有其他黄酮类的合成【４　。　３参与生物碱次生代谢合成的转录因子　以生物碱为主要药效成分的药用植物有雷公藤　Ｔｒｉｐｔｅｒｙｇｉｕｍ　ｗｉｌｆｏｒｄｉｉ　Ｈｏｏｋ．ｆ、长春花、苦参Ｓｏｐｈｏｒａ　等。生物碱药效成分包括萜类生物碱雷公藤碱，异　ｂＨＬＨ类转录因子不仅能够１条或多条黄　ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ　Ａｉｔ．、喜树Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃａ　ａｃｕｍｉｎａｔａ　Ｄｅｃｎｅ．　成的生理功能　引。如拟南芥中的ｂＨＬＨ类蛋白既调　控黄酮类化合物合成途径中的关键酶基因，又参与　腺毛或根毛的形成和发育Ｌ４引。在玉米中ＺｍＬｃ仅调　控花青素的合成，但是将其在拟南芥中过表达会使　腺毛的数量增加，并伴有花青素的合成【４　。　２．３　ＷＤ４０转录因子　ＷＤ４０蛋白是一种具有Ｂ．螺旋结构的超家族，　通常含有４４￣６０个氨基酸，包含１～１０个串联的　ＷＤ４０基序，每个基序具有保守的Ｎ端ＧＨ　（Ｇｌｙ—Ｈｉｓ）和Ｃ端ＷＤ（Ｔｒｐ—Ａｓｐ）。ＷＤ４０转录因　子具有信号转导、转录、细胞运动及衰老　的功能　引。参与黄酮类化合物合成的ＷＤ４０相　继在拟南芥（ＴＴＧ１）、紫苏Ｐｅｒｉｌｌａ　ｆｌｒｕｔｅｓｃｅｎｓ（Ｌ．）　Ｂｒｉｔｔ．（ＰｆＰＦＷＤ）、玉米（ＺｍＰＡＣ１）、苜蓿Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｓａｔｉｖａ　Ｌｉｎｎ．（ＭｔＷＤ４０—１）、苹果Ｍａｌｕｓｐｕｍｉｌａ　Ｍｉｌ１．　（ＭｄＴＴＧ１）、葡萄Ｖｉｔｉｓ　ｖｉｎｉｆｅＦａ　Ｌ．（ＷＤＲ１和ＷＤＲ２）　等中被分离。ＷＤ４０重复蛋白可以同时与其他几种　转录蛋白相互作用，甚至成为蛋白之间相互作用的　关键位点，所以会参与到不同的生物途径中。　研究发现，其主要的配体是ｂＨＬＨ和ＭＹＢ转录因　子。ｂＨＬＨ转录因子和ＭＹＢ转录因子通过蛋白与　蛋白之间的相互作用进而诱导结合ＤＮＡ，ＷＤ４０转　录因子调节促进蛋白问的相互作用，使其产生更强　的效应，在植物体中常以三元复合体　ＭＹＢ．ｂＨＬＨ．ＷＤ４０的形式存在Ｌ３引。如拟南芥中至　少存在４种ＭＹＢ—ｂＨＬＨ．ＷＤ４０（ＭＢＷ）复合体参　与种皮中原花色素（ＰＡｓ）的积累，分别是ＴＴ２．ＴＴ８、　ＧＬ３、ＥＧＬ３．ＴＴＧ１和ＭＹＢ５一ＴＴ８一ＴＴＧ１。复合体　ＴＴ２．ＴＴ８一ＴＴＧ１主要花青素下游合成途径的关　键酶基因的表达，而ＴＴ２．ＥＧＬ３、ＧＬ３．ＴＴＧ１复合　体则激活花青素还原酶（ＢＡＮ）基因的表达，ＴＴＧ１　（ＷＤ４０）主要是调节三元复合体的相互作用来阻止　其不易降解而ＢＡＮ的表达，进而调节花青素　的合成Ｌ４川。蒺藜苜蓿Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ　Ｇａｅｒｔｎ．中　喹啉类生物碱小檗碱、药根碱、黄连碱，吲哚类生　物碱喜树碱、长春碱，喹诺里西啶类生物碱苦参碱　等。大多数生物碱具有不同的、显著的生理活性，　如黄连Ｃｏｐｔｉｓ　ｊａｐｏｎｉｃａ　Ｍａｋｉｎｏ中的小檗碱具有抗菌　消炎作用；萝芙木Ｒａｕｖｏｌｉｆａ　ｖｅｒｔｉｃｉｌｌａｔａ（Ｌｏｕｒ．）Ｂａｉｌ１．　中的利血平具有降压作用；长春花中的长春新碱具　有抗癌活性；苦参中的苦参碱具有抗炎、抗过敏作　用；喜树中的喜树碱具有抗肿瘤作用。　长春花中相继鉴定了参与ＴＩＡｓ代谢途径　的ＣｒＯＲＣＡｓ、ＣｒＭＹＣｓ、ＣｒＺＣＴｓ和ＣｒＷＲＫＹｓ等转　录因子，这些转录因子可独自正、负１个或多　个酶，也能共表达多个酶促反应，ＪＡ能够诱导　由这些转录因子构成的ＴＩＡｓ代谢途径网络【４引。　利用酵母单杂交技术从红豆杉中筛选到了１个　可以和ｔｓ启动子ＪＡ响应区结合的ｂＨＬＨ家族类转　录因子ＴｃＭＹＣ蛋白和１个可与ｄｂａｔ启动子ＳＡ响　应区结合的ＷＲＫＹ家族类转录因子ＴｃＷＲＫＹ１。　ＲＮＡｉ技术和基因过表达分析发现ＴｃＷＲＫＹ１能激　活ｄｂａｔ基因的表达，ＴｃＭＹＣ则可激活ｔｓ基因的表　达，进而紫杉醇的合成［　。　黄连中的ＷＲＫＹ类转录因子ＣｉＷＲＫＹ１能够　异喹啉类生物碱（ＩＱＡｓ）合成基因的表达。利　用ＲＮＡｉ技术减弱黄连细胞原生质体中ＣｉＷＲＫＹ１　的表达水平，发现大部分小檗碱生物合成基因的表　达情况也相应地减弱，过表达ＣｉＷＲＫＹ１使几乎所　有参与小檗碱生物合成的基因表达水平上调，由此　可见ｃｊＷＲＫＹ１转录因子是ＩＯＡｓ生物合成的调节　器【５ｏ］。同样，通过ＲＮＡｉ和过表达实验在黄连中发　现了另一个ＩＱＡｓ合成的ｂＨＬＨ类转录因子　ＣｉｂＨＬＨ１。且染色质免疫沉淀实验表明ｃｊｂＨＬＨ１　在胞内直接与ＩＯＡｓ生物合成基因启动子序列结合　而发挥作用　。　目前已鉴定的萜类、黄酮类、生物碱类药　效成分合成的转录因子见表１。　中草焉Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　表１　目前已鉴定的药效成分合成的转录因子　・３１０５・　Ｔａｂｌｅ　１　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ｍｅｄｉｃｉｎａｌ　ｐｌａｎｔｓ　４其他代谢产物合成的转录因子　丹参Ｓａｌｖｉａ　ｍｉｌｔｉｏｒｒｋｉｚａ　Ｂｕｎｇｅ的水溶性酚酸类　化合物是其主要药用成分之一。王浩如等Ｌ５８Ｊ发现了　此从转录因子角度进行代谢工程还有另外一种策　略，即调节控制腺毛发育的转录因子。腺毛的发育　受转录因子，在拟南芥中ＷＤ４０重复蛋白　（ＴＴＧ１）、Ｒ２Ｒ３一ＭＹＢ蛋白（ＧＬ１）和ｂＨＬＨ蛋白（ＧＬ３　１个ｂＨＬＨ类转录因子ＳｍＭＹＣ，利用农杆菌转化　法将ＳｍＭＹＣ特异性沉默的ａｍｉＲＮＡ植物表达载体　导入丹参后发现，阳性株系中ＳｍＭＹＣ的ｍＲＮＡ　表达水平均呈现下降趋势，酚酸类代谢途径中相关　酶基因的表达水平也表现出相应的下降趋势，因此，　或ＥＧＬ３）组成了１个有活性的ＭＹＢ—ｂＨＬＨ．ＷＤ４０　复合体，该复合体能够诱导毛状体形成。过表达ＧＬ１　导致腺毛数量减少，说明ＧＬ１在腺毛形成过程中起　到负Ｌ６…。ＧＬ２和ＧＬ３在腺毛的形态建成方面起　作用，且对ＧＬ３进行过量表达可使腺毛数目增　加［６０－６６］。Ｐａｙｎｅ等【６　７Ｉ研究发现ＡｔＭＹＣ１是腺毛　和根毛形成的１个重要转录因子，且ＡｔＭＹＣ１与　初步认为丹参中ＳｍＭＹＣ可能作为１个重要的转录　因子参与酚酸类活性物质的代谢。刘芬　９］将拟　南芥中的ＰＡＰ２转录因子在丹参中异位表达，发现　其可有效激活苯丙烷类代谢途径，调节该途径终产　物丹酚酸Ｂ的合成和积累。　ＧＬ３／ＥＧＬ３存在部分同源序列，此同源序列对于　ＭＹＢ蛋白相互作用并发挥相应功能是必不可少的。　因此，通过调节转录因子的活性来增加腺毛的密度，　腺毛是多种药用植物药效成分合成的部位，因　・３１０６・　中草荡Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　进而增加腺毛中活性物质的产量，从而大幅度提高　中药中有效成分的量是可行有效的。　５结语　天然产物生物合成受植物体严格控制，包括转　录、发育和时空及翻译后等。早在利　用大规模测序挖掘酶基因和基因研究迅速发展　起来之前，就有学者指出转录因子是通过生物工程　生产源于植物代谢的药理活性成分的重要工具［５，６８ｌ。　利用转录因子代谢途径的优势在于有些转录因　子不仅能途径中的单个酶基因，往往可以　多个酶基因协同表达，可有效启动和关闭次生代谢　合成途径，从而调节特定次生代谢物的合成。还可　以改变代谢产物产生的植物组织器官，甚至在天然　不产生某种代谢产物的植物中产生新的代谢产　物。随着植物次生代谢机制的阐明，特别是随　着调节特定次生代谢物合成的转录因子的分离和鉴　定，转录因子基因工程将为人类开发利用植物次生　代谢物这一巨大的宝库提供有效的手段。　目前，在天然活性成分生物合成途径和方　面研究还很薄弱，鉴定出的代谢途径中的靶基　因还较少，很多研究仅仅是发现了转录因子和成分　合成相关，但具体的靶基因和作用机制还不清　晰。另外，该领域的研究主要集中在长春花、青蒿、　红豆杉等少数物种，与药用植物中药效成分合成相　关的转录因子报道还不多，而且有关转录因子　机制的研究还不透彻，大部分的转录因子还处于认　识和探索阶段，离应用开发还有一定距离。同时，　次生代谢物生物合成过程的比较复杂，其合成　还与环境刺激因子如光、温度和营养供给有关；此　外，也受内部因子的作用，如生长调节因子、代谢　物以及组织特殊发育阶段的影响。不同的因子　控制了生物合成途径的不同部分，不同的因子　之间也存在着相互作用，而这些机制仍需要进　一步研究。总之，研究药用植物药效成分的生物合　成及其基因模式，将有利于更好地采用基因工　程手段改良植物次生代谢途径。　参考文献　［１］Ｌｉｕ　Ｄ　Ｈ，Ｒｅｎ　Ｗ　ｗ，Ｃｕｉ　Ｌ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｅｎｈａｎｃｅｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ　ａｎｄ　ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｂｙ　ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｆａｃｔｏｒ　ＯＲＣＡ２［Ｊ］．　Ｊ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，２０　１　１，　１ｏ（１７、：３２６０—３２６８．　［２］Ｐａｕｗ　Ｂ，Ｈｉｌｌｉｏｕ　Ｆ　Ａ，Ｍａｒｔｉｎ　Ｖ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｚｉｎｃ　ｆｉｎｇｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｃｔ　ａｓ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｐｒｅｓｓｏｒｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　Ｆｏｓｅ￣ｓ［Ｊ］．　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，２００４，７９（５　１）：５２９４０—５２９４８．　［３］　Ｂａｕｄｒｙ　Ａ，Ｈｅｉｍ　Ｍ　Ａ，Ｄｕｂｒｅｕｃｑ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．ＴＴ２，ＴＴ８，ａｎｄ　ＴＴＧ　１　ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃａｌｌｙ　ｓｐｅｃｉｆｙ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＢＡＮＹＵＬＳ　ａｎｄ　ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈａｌｉａｎａ【Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　２００４，３９（３）：３６６—３８０．　［４］　Ｚｈａｎｇ　Ｈ，Ｈｅｄｈｉｌｉ　Ｓ，Ｍｏｎｔｉｅｌ　Ｇ　ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｂａｓｉｃ　ｈｅｌｉｘ－－ｌｏｏｐ－－ｈｅｌｉｘ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ＣｒＭＹＣ２　ｃｏｎｔｒｏｌｓ　ｔｈｅ　ｊａｓｍｏｎａｔｅｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ＯＲＣＡ　ｇｅｎｅｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅＨｓ　［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　２０１１，６７（１）：６１—７１．　［５］　Ｂｒｏｕｎ　Ｐ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ａｓ　ｔｏｏｌｓ　ｆｏｒ　ｍｅｔａｂｏｌｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｃｕｒｒ　Ｏｐｉｎ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｌ，２００４，　７（２１：２０２—２０９．　［６］　Ｙａｎｇ　Ｃ　Ｑ，Ｆａｎｇ　Ｘ，Ｗｕ　Ｘ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．Ｊ　Ｉｎｔｅｇｒ　ＰｌａｎｔＢｉｏｌ，２０１２，５４（１０）：７０３—７１２．　［７】　Ｐａｄｄｏｎ　Ｃ　Ｊ，Ｗｅｓｔｆａｌｌ　Ｐ　Ｊ，Ｐｉｔｅｒａ　Ｄ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｈｉｇｈ—ｌｅｖｅｌ　ｓｅｍｉ－ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｔｅｎｔ　ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，２０１　３，４９６（７４４６）：５２８—５３２．　［８］　Ｄａｉ　Ｚ　Ｂ，Ｗａｎｇ　Ｂ　Ｂ，Ｌｉｕ　ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　ａｇｌｙｃｏｎｓ　ｏｆ　ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅｓ　ｉｎ　ｂａｋｅｒｓ’ｙｅａｓｔ［Ｊ］．Ｓｃｉ　Ｒｅ／），２０１４，４：　３６９８．３７０３．　［９］　Ｅｎｇｅｌｓ　Ｂ，Ｄａｈｍ　Ｐ＇Ｊｅｎｎｅｗｅｉｎ　Ｓ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　ｏｆ　ｔａｘａｄｉｅｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｙｅａｓｔ　ａｓ　ａ　ｆｉｒｓｔ　ｓｔｅｐ　ｔｏｗａｒｄｓ　ｔａｘｏｌ（ｐａｃｌｉｔａｘｅ１）ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｍｅｔａｂ　Ｅｎｇ，２００８，　１０（３／４）：２０１—２０６．　［１０］　Ｄａｉ　Ｚ　Ｂ，Ｌｉｕ　１Ｙ，’Ｇｕｏ　Ｊ，　ａ１．Ｙｅａｓｔ　ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｂｉｏｌｏｇｙ　ｆｏｒ　ｈｉｇｈ　ｖａｌｕｅ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ［Ｊ］．ＦＥＭＳ　Ｙｅａｓｔ　Ｒｅｓ，２０１５，ｌ５（１）：　１—１１．　王凌健，方　欣，杨长青，等．植物萜类次生代谢及其　［Ｊ］．中国科学：生命科学，２０１３，４３（１２）：１０３０—１０４６．　［１２］　赵恒伟，葛锋，孙颖，等．植物萜类物质生物合成　的相关转录因子及其应用前景［Ｊ】．中草药，２０１２，　４３（１２）：２５１２—２５１９．　［１３］　张计育，王庆菊，郭忠仁．植物ＡＰ２／ＥＲＦ类转录因子　研究进展［Ｊ］＿遗传，２０１２，３４（７）：８３５．８４７．　［１４］　Ｙｕ　Ｚ　Ｘ，Ｌｉ　Ｊ　Ｘ，Ｙａｎｇ　Ｃ　Ｑ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ＡＰ２／ＥＲＦ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ＡａＥＲＦ　１　ａｎｄ　ＡａＥＲＦ２　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎ　ｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ａｎｎｕａ　Ｌ＿［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｐｌａｎｔ，２０１２，　５（２）：３５３—３６５．　［１５］　Ｌｕ　Ｘ，Ｚｈａｎｇ　Ｌ，Ｚｈａｎｇ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．ＡａＯＲＡ，ａ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ—ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ＡＰ２／ＥＲＦ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｆ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ａｎｎｕａ，ｉｓ　ａ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｐａｔｈｗａｙ　ａｎｄ　ｉｎ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　Ｂｏｔｒｙｔｉｓ　ｃｉｎｅｒｅａ［Ｊ］．Ｎｅｗ　Ｐｈｙｔｏｌ，２０１３，１９８（４）：１　１９１—１２０２．　【１６】　Ｍｅｎｋｅ　Ｆ　Ｌ　Ｈ，Ｃｈａｍｐｉｏｎ　Ａ，Ｋｉｊｎｅ　Ｊ　ｗ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｎｏｖｅｌ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ａｎｄ　ｅｌｉｃｉｔ０卜ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｅｌｅｍｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｅｒｉｗｉｎｋｌｅ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｇｅｎｅ　ｓｔｒｉｎｔｅｒａｃｔｓ　ｗｉｔｈ　ａ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ　ａｎｄ　ｅｌｉｃｉｔｏｒ－ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ＡＰ２一ｄｏｍａｉｎ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ，ＯＲＣＡ２［Ｊ］＿ＥＭＢＯ　中草焉Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄ　Ｈｅｒｂａｌ　Ｄｒｕｇｓ第４６卷第２Ｏ期２０１５年１Ｏ月　・３１０７・　１９９９，１８（１６）：４４５５‘４４６３．　［１　７］Ｂｏｅｒ　Ｋ　Ｄ，Ｔｉｌｌｅｍａｎ　Ｓ，Ｐａｕｗｅｌｓ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．ＡＰＥＴＡＬＡ２／　ＥＴＨＹＬＥＮＥ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｂａｓｉｃ　ｈｅｌｉｘ－ｌｏｏｐ—ｈｅｌｉｘ　ｔｏｂａｃｃｏ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅｌｙ　ｍｅｄｉａｔｅ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ｅｌｉｃｉｔｅｄ　ｎｉｃｏｔｉｎｅ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　２０１１，６６（６）：１０５３—１０６５．　【１　８］Ｖａｎ　ｄｅｒ　Ｆｉｔｓ　Ｌ，Ｍｅｍｅｌｉｎｋ　Ｊ．Ｔｈｅ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ＡＰ２／ＥＲＦ－ｄｏｍａｉｎ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ＯＲＣＡ３　ａｃｔｉｖａｔｅｓ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｖｉａ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—　ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｅｌｅｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　２００１，２５（１）：　４３—５３．　［１９］Ｍｅｍｅｌｉｎｋ　Ｊ，Ｇａｎｔｅｔ　Ｒ　Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｉｎｄｏｌｅ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ［Ｊ］．Ｐ　ｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００７，６（２／３）：３５３—３６２．　［２０］Ｄａｉ　Ｙ　Ｌ，Ｑｉｎ　Ｑ　Ｌ，Ｄａｉ　Ｄ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｃＤＮＡ　ｅｎｃｏｄｉｎｇ　ｍｅｔｈｙｌ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ＴｃＡＰ２　ｆｒｏｍ　Ｔａｘｕｓ　ｃｕｓｐｉｄａｔｅ［Ｊ】＿Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ　Ｌｅｔｔ，２００９，３１（１１）：　１８０１—１８０９．　［２１］戴怡龄．红豆杉中与异戊二烯代谢途径相关的ＡＰ２类　转录因子的克隆与功能研究［Ｄ］．上海：复旦大　学，２００８．　［２２］田云，卢向阳，彭丽莎，等．植物ＷＲＫＹ转录因子结构　特点及其生物学功能［Ｊ］．遗传，２００６，２８（１２）：１６０７—１６１２．　［２３】Ｍａ　Ｄ，Ｐｕ　Ｇ　Ｌｅｉ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡａＷＲＫＹ　１，ａｎ　Ａｒｔｅｍｉｓｉａ　ａｎｎｕａ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｈａｔ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｔｈｅ　ａｍｏｒｐｈａ・４，１　１一ｄｉｅｎｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ，ａ　ｋｅｙ　ｇｅｎｅ　ｏｆ　ａｒｔｅｍｉｓｉｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］＿Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｐ　Ｄ，，　２００９．５０（１２）：２１４６—２１６１．　［２４］杨致荣，王兴春，薛金爱，等．药用植物长春花　ＷＲＫＹ转录因子的鉴定及表达谱分析［Ｊ］．生物工程　学报，２０１３，２９（６）：７８５．８０２．　［２５］张　鑫，宋经元，胡鸢雷，等．ｂＨＬＨ转录因子植　物活性成分生物合成的研究进展［Ｊ］．药学学报，２０１４，　４９（４）：４３５—４４２．　［２６］Ｃｈａｔｅｌ　Ｇ　Ｍｏｎｔｉｅｌ　Ｇ　Ｐｒ６　Ｍ，ｅｔ　ａ１．ＣｒＭＹＣ１，ａ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ　ｅｌｉｃｉｔｏｒ－ａｎｄ　ｊａｓｍｏｎａｔｅ—ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ　ｂＨＬＨ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｈａｔ　ｂｉｎｄｓ　ｔｈｅ　Ｇ—ｂｏｘ　ｅｌｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｒｉｃｔｏｓｉｄｉｎｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ［Ｊ］．Ｊ　Ｅｘｐ　Ｂｏｔ，　２００３，５４（３９２）：２５８７—２５８８．　［２７］Ｎｉｍｓ　Ｅ，Ｖｏｎｇｐａｓｅｕｔｈ　Ｋ，Ｒｏｂｅｒｔｓ　Ｓ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．ＴｃＪＡＭＹＣ：ａ　ｂＨＬＨ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｈａｔ　ａｃｔｉｖａｔｅｓ　ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｐａｔｈｗａｙ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｙｅｗ［ＪＪ．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，　２００９，ｄｏｉ：１０．１０７４／ｊｂｃ．Ｍ１０９．０２６１９５．　【２８】张计育，渠慎春，郭忠仁，等．植物ｂＺｌＰ转录因子的生　物学功能［Ｊ］．西北植物学报，２０１１，３１（５）：１０６６—１０７５．　［２９］Ｓｉｂｒｒｉｌ　Ｂｅｎｈａｍｒｏｎ　Ｓ，Ｍｅｍｅｌｉｎｋ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ　Ｇ—ｂｏｘ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒｓ　１　ａｎｄ　２　ａｃｔ　ａｓ　ｒｅｐｒｅｓｓｏｒｓ　ｏｆ　ｓｔｒｉｃｔｏｓｉｄｉｎｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｃｅｌｌ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．　ＰｌａｎｔＭｏｌＢｉｏｌ，２００１，４５（４）：４７７－４８８．　［３０］Ｐａｕｗ　Ｂ，Ｈｉｌｌｉｏｕ　Ｆ　Ａ　Ｏ，Ｍａｒｔｉｎ　Ｖ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｚｉｎｃ　ｆｉｎｇｅｒ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ａｃｔ　ａｓ　ｔａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｐｒｅｓｓｏｒｓ　ｏｆ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，２００４，２７９（５１）：５２９４０－５２９４８．　［３１】沈忠伟，许昱，夏彝，等．植物类黄酮次生代谢生　物合成相关转录因子及其在基因工程中的应用［Ｊ］．分　子植物育种，２００８，６（３）：５４２．５４８．　［３２］康亚兰，裴　瑾，蔡文龙，等．药用植物黄酮类化合物　代谢合成途径及相关功能基因的研究进展［Ｊ］．中草　药，２０１４，４５（９）：１３３６．１３４１．　［３３］乔小燕，马春雷，陈　亮．植物类黄酮生物合成途径及　重要基因的［Ｊ］．天然产物研究与开发，２００９，　２１（２）：３５４—３６０．　［３４］刘淑君，万红建，叶青静，等．植物ＭＹＢ转录因子的　研究进展［Ｊ］＿分子植物育种：网络版，２０１１，９（１１４）：　１８３５—１８４２．　［３５］赵海霞，吴小峰，吴　琦，等．苦荞芽期黄酮合成关键　酶和ＭＹＢ转录因子基因的表达分析【Ｊ］．农业生物技　术学报，２０１２，２０（２）：１２１．１２８．　［３６］虎萌．苦荞转录因子ＦｔＭＹＢ１和ＦｔＭＹＢ２对烟草黄酮　合成关键酶基因表达和黄酮积累的影响［Ｄ］．成都：　四川Ｉ农业大学，２０１２．　［３７］伍　种．黄芩ＭＹＢ转录因子功能初步研究［Ｄ］．武汉：　武汉工业学院，２０１２．　［３８］Ｓｈｏｕ　ｅ　Ｗａｎｇ　Ｙ　Ｌ，Ｙａｎｇ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｐｅａｒｓ　ｉｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ａ　Ｒ２Ｒ３－ＭＹＢ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ＰｙＭＹＢ１０［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２０１０，２３２（１）：　２４５—２５５．　［３９］Ｗｉｎｋｅｌ－Ｓｈｉｒｌｅｙ　Ｂ．Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ａ　ｃｏｌｏｒｆｕｌ　ｍｏｄｅｌ　ｆｏｒ　ｇｅｎｅｔｉｃｓ，ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｃｅｌｌ　ｂｉｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ尸　ｉｏｌ，２００１，１２６（２）：４８５－４９３．　［４０】Ｅｓｐｌｅｙ　Ｒ　Ｂｒｅｎｄｏｌｉｓｅ　Ｃ，Ｈｅｌｌｅｎｓ　Ｒ　Ｐ’ｅｔ　ａ１．Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｒｅｐｅａｔｓ　ｏｆ　ａ　ｐｒｏｍｏｔｅｒ　ｓｅｇｍｅｎｔ　ｃａｕｓｅｓ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ａｕｔｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒｅｄ　ａｐｐｌｅｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ，２００９，２１（１）：　ｌ６８．１８３．　『４１１　Ｌｉｕ　Ｘ　Ｆ，Ｙｉｎ　Ｘ　Ｒ，Ｘｕ　Ｃ　Ｊ’　ａ１．Ｔｈｅ　Ｒｏｌｅ　ｏｆＭｒｂＨＬＨｌ　ｎａｄ　ＭｒＭＹＢ　１　ｉｎ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎ　ｔｏｂａｃｃｏ　ａｎｄ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｂａｙｂｅｒｒｙ（Ｍｙｒｉｃａ　ｒｕｂｒａ）　ｄｕｒｉｎｇ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［ＪＪ．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｏｒｇａｎ　Ｃｕｌｔｕｒｅ，２０１３，１　１５（３）：２８６—２９８．　［４２］Ｈｉｃｈｒｉ　Ｉ，Ｂａｒｒｉｅｕ　Ｆ＇Ｂｏｇｓ　Ｊ，　ａ１．Ｒｅｃｅｎｔ　ａｄｖａｎｃｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｔａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ　ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．ＪＥｘｐ　Ｂｏｔ，２０１１，６２（８）：２４６５—２４８３．　［４３］Ｈｅｉｍ　Ｍ　Ａ，Ｊａｋｏｂｙ　Ｍ，Ｗｅｒｂｅｒ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｂａｓｉｃ　ｈｅｌｉｘ・－ｌｏｏｐ－－ｈｅｌｉｘ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｆａｍｉｌｙ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ：ａ　ｇｅｎｏｍｅ—ｗｉｄｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｆＪ］．Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ　Ｅｖｏｌ，２００３，２Ｏ（５）：７３５—７４７．　［４４］Ｌｌｏｙｄ　Ａ　Ｍ，Ｗａｌｂｏｔ　Ｄａｖｉｓ　Ｒ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ａｎｄ　ｎｉｃｏｔｉａｎａ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ｂｙ　ｍａｉｚｅ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　Ｒ　ａｎｄ　Ｃ　１［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１　９９２，２５８（５０８９）：　１７７３．１７７５．　【４５］李宗艳，李名扬．植物类黄酮生物合成的转录因　子研究进展［Ｊ］．南京林业大学学报：自然科学版，　２０ｌ１，３５ｆ５）：１２９・１３４．　・３１０８・　中草焉ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　ａｎｄＨｅｒｂａｌＤｒｕｇｓ第４６卷第２０期２０１５年１０月　［４６］Ｘｕ　Ｗ　Ｊ，Ｄｕｂｏｓ　Ｃ，Ｌｅｐｉｎｉｅｃ　Ｌ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｂｙ　ＭＹＢ－－ｂＨＬＨ・－ＷＤＲ　ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉ，２０１５，２０（３）：１７６・１８５．　［４７］Ｐａｎｇ　Ｙ　Ｚ，Ｗｅｎｇｅｒ　Ｊ　ＳａａｔｈｏｆｆＫ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ＷＤ４０　ｒｅｐｅａｔ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｍｅｄｉｃａｇｏ　ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ　ｉｓ　ｎｅｃｅｓｓａｒｙ　ｆｏｒ　ｔｉｓｓｕｅ－ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ａｎｄ　ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｂｕｔ　ｎｏｔ　ｆｏｒ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００９，１５１（３）：ｌ１１４—１１２９．　［４８］杨致荣，陈钊，李润植．茉莉素介导的长春花生物碱　次生代谢转录机制［Ｊ］．中国生物化学与分子生物　学报，２０１４，３０ｆ６）：５３３—５４２．　［４９］李书涛．紫杉醇合成转录因子ＴｃＭＹＣ和　ＴｃＷＲＫＹ１的克隆及功能研究［Ｄ］．武汉：华中科技大　学，２０１２．　［５０】Ｋａｔｏ　Ｎ，Ｄｕｂｏｕｚｅｔ　Ｅ，Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ　ｅｌ　ａ１．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ＷＲＫＹ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｓ　ａ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｏｆ　ｂｅｎｚｙｌｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｃｏｐｔｉｓ　ｊａｐｏｎｉｃａ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｐ　ｉｏｌ，２００７，４８（１）：８－１　８．　［５　１】Ｙａｍａｄａ　Ｋｏｋａｂｕ　Ｃｈａｋｉ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｓ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ａ　ｕｎｉｑｕｅ　ｂＨＬＨ－ｔｙｐｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ　Ｃｏｐｔｉｓ　ｊａｐｏｎｉｃａ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｐ　ｉｏＩ，２０１１，５２（７）：１１３１－１１４１．　【５２】Ｓｃｈｗｉｎｎ　Ｋ，Ｖｅｎａｉｌ　Ｊ，Ｓｈａｎｇ　ｅｔ　ａ１．Ａ　ｓｍａｌｌ　ｆａｍｉｌｙ　ｏｆ　ＭＹＢ－ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｇｅｎｅｓ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ　ｆｌｏｒａｌ　ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ　ａｎｄ　ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ　ｉｎ　ｇｅｎｕｓ　Ａｎｔｉｒｒｈｉｎｕｍ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ，２００６，１８（４）：８３１－８５１．　［５３］Ｇｏｏｄｒｉｃｈ　Ｊ，Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ　Ｒ，Ｃｏｅｎ　Ｅ　Ｓ．Ａ　ｃｏｍｍｏｎ　ｇｅｎｅ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｐａｔｔｅｒｎ　ｉｎ　ｄｉｖｅｒｓｅ　ｐｌａｎｔ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．　ＣＰ，，，１９９２，６８（５）：９５５—９６４．　［５４］Ｎａｋａｔｓｕｋａ　Ｔ，Ｈａｒｕｔａ　Ｋ　Ｓ，Ｐｉｔａｋｓｕｔｈｅｅｐｏｎｇ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．　Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒ２Ｒ３一ＭＹＢ　ａｎｄ　ｂＨＬＨ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　ｇｅｎｔｉａｎ　ｆｌｏｗｅｒｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌｌ　Ｐ垣　ｉｏｌ，　２００８，４９（１２）：１８１８－１８２９．　［５５］Ｎａｋａｔｓｕｋａ　Ｔ’Ｓａｉｔｏ　Ｍ，Ｙａｍａｄａ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＧｔＭＹＢＰ３　ａｎｄ　ＧｔＭＹＢＰ４，　ｏｒｔｈｏｌｏｇｕｅｓ　ｏｆ　Ｒ２Ｒ３一ＭＹＢ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｔｈａｔ　ｒｅｇｕｌａｔｅ　ｅａｒｌｙ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｉｎｇｅｎｔｉａｎ　ｆｌｏｗｅｒｓ　［Ｊ］．ＪＥｘｐ　Ｂｏｔ，２０１２，６３（１８）：６５０５—６５１７．　［５６］蒙　华．苦荞ＭＹＢ转录因子基因的克隆及转录激活　功能鉴定［Ｄ］．雅安：四』１Ｉ农业大学，２０１１．　［５７］Ｓｕｔｔｉｐａｎｔａ　Ｎ，Ｐａｔｔａｎａｉｋ　Ｓ，Ｋｕｌｓｈｒｅｓｔｈａ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ　ＣｒＷＲＫＹ１　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｔｅｒｐｅｎｏｉｄ　ｉｎｄｏｌｅ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｉｎ　Ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ　ｒｏｓｅｕｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌ，２０１１，１５７（４）：２０８１—２０９３，　［５８］王浩如，王　健，王仕英，等．丹参转录因子基因　ＳｍＭＹＣ　ａｍｉＲＮＡ表达载体的构建及其对丹参的转化　［Ｊ］．植物生理学报，２０１３，４９（１２）：１３３９—１３４６．　［５９］刘　芬．转录因子ＰＡＰ２对丹参酚酸类产物合成的影响　［Ｄ］．西安：陕西师范大学，２０１１．　［６０］Ｓｚｙｍａｓｎｓｋｉ　Ｄ　Ｂ，Ｋｌｉｓ　Ｄ　Ａ，Ｌａｒｋｉｎ　Ｊ　Ｃ，　ａ１．Ｃｏｔｌ：ａ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒ　ｏｆ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，　１９９８，１４９（２）：５６５・５７７．　［６　１］Ｂａｌｋｕｎｄｅ　Ｒ，Ｐｅｓｃｈ　Ｍ，Ｈｆｉｌｓｋａｍｐ　Ｍ．Ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ　ｉｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈａｌｉａｎａ　ｆｒｏｍ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｏ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｏｄｅｌｓ　［　Ｃｕｒｒ　Ｔｏｐ　ＤｅｖＢｉｏｌ，２０１０，９１：２９９－３２１．　［６２］Ｔｏｍｉｎａｇａ—Ｗａｄａ　Ｒ，Ｉｓｈｉｄａ　ｗａｄａ　Ｎｅｗ　ｉｎｓｉｇｈｔｓ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｄｅｖ—ｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｒｏｏｔ　ｈａｉｒｓ　ａｎｄ　ｔｒｉｃｈｏｍｅｓ［Ｊ］．／ｎｔ　Ｒｅｖ　Ｃｅｌｌ　Ｍｏｌ　Ｂｉｏｌ，２０１１，２８６：　６７—１０６．　［６３］Ｐｅｓｃｈ　Ｍ，Ｈｔ￣ｌｓｋａｍｐ　Ｍ．Ｏｎｅ，ｔｗｏ，ｔｈｒｅｅ…ｍｏｄｅｌｓ　ｆｏｒ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ　ｉｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　．Ｃｕｒｒ　Ｏｐｉｎ　Ｐｌａｎｔ　Ｂｉｏｌ，２００９，１２（５）：５８７—５９２．　［６４］Ｂｅｎｒｈａｒｄｔ　Ｃ，Ｌｅｅ　Ｍ　Ｍ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｂＨＬＨ　ｇｅｎｅｓ　ＧＬＡＢＲＡ３（ＧＬ３）ａｎｄ　ｅｎｈａｎｃｅｒ　ｏｆ　ＧＬＡＢＲＡ３　（ＥＧＬ３）ｓｐｅｃｉｆｙ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｃｅｌｌ　ｆａｔｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｒｏｏｔ『Ｊ］．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００３，１３０（２６）：６４３１—６４３９．　【６５］Ｚｈａｏ　Ｍ，Ｍｏｒｏｈａｓｈｉ　Ｋ，Ｈａｔｌｅｓｔａｄ　Ｇ　ｅｌ　ａ１．Ｔｈｅ　ＴＴＧ１－－ｂＨＬＨ－－ＭＹＢ　ｃｏｍｐｌｅｘ　ｃｏｎｔｒｏｌｓ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｃｅｌｌ　ｆａｔｅ　ａｎｄ　ｐａｔｔｅｒｎｉｎｇ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｄｉｒｅｃｔ　ｔａｒｇｅｔｉｎｇ　ｏｆ　ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ　ｌｏｃｉ　［Ｊ］．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，２００８，１３５（１　１）：１９９１—１９９９．　［６６］Ｚｈａｎｇ　Ｆ，Ｇｏｎｚａｌｅｚ　Ａ，Ｚｈａｏ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｎｅｔｗｏｒｋ　ｏｆ　ｒｅｄｕｎｄａｎｔ　ｂＨＬＨ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ａｌｌ　ＴＴＧ　１一　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｐａｔｈｗａｙｓ　ｏｆ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，　２００３，１３０（２０）：４８５９—４８６９．　［６７］Ｐａｙｎｅ　Ｃ　Ｚｈａｎｇ　Ｆ，Ｌｌｏｙｄ　Ａ　Ｍ．ＧＬ３　ｅｎｃｏｄｅｓ　ａ　ｂＨＬＨ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｔｈａｔ　ｒｅｇｕｌａｔｅｓ　ｔｒｉｃｈｏｍｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｉｎ　Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ＧＬ１　ａｎｄ　ＴＴＧ１［Ｊ］　．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０００，１　５６（３）：１　３４９－１　３６２．　［６８］Ｇａｎｔｅｔ　Ｍｅｍｅｌｉｎｋ　Ｊ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒｓ：ｔｏｏｌｓ　ｔｏ　ｅｎｇｉｎｅｅｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ　ａｃｔｉｖｅ　ｐｌｎａｔ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ　［Ｊ］＿Ｔｒｅｎｄｓ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｓｃｉ，２００２，２３（１２）：５６３—５６９．